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Previous issue date: 2018-02-27 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Listeriosis is a bacterial infection caused by Listeria monocytogenes, a bacterium transmitted
mainly by the ingestion of contaminated food. It is the main responsible for food infections with
low morbidity rate, but when contamination occurs in immunosuppressed the mortality rates are
high, representing an important public health problem. Methods available for identification of the
presence of Listeria monocytogenes include isolation of the bacterium through conventional
culture, laborious, time-consuming and low sensitivity method, and usually complex and costly
molecular and / or immunological methods requiring trained personnel and equipment. Therefore,
the search for rapid, sensitive and specific methods for detecting the presence of Listeria
monocytogenes in foods is useful and necessary for infection prevention and great value to reduce
the mortality rate in the immunocompromised as well as to enable the epidemiological surveillance
of this disease. The objectives of the study were: To develop lateral flow immunochromatographic
test for the identification of L. monocytogenes in foods; To evaluate the performance of the lateral
flow immunochromatographic test using food samples naturally and artificially contaminated with
L. monocytogenes. As the detection agent, were impregnated glass fiber with anti-internalin-A
MAb-2D12 conjugated to colloidal gold. As a capture agent, were sensitized, on nitrocellulose
paper, the test line with polyclonal anti-internalin-B antibody, and in the control line with protein
A, to validate the activity of the detection agent. Inoculations of standard strains of Listeria
monocytogenes were used for evaluation of the Listeria detection in the proposed test. As a
negative control, we used strains of Listeria innocua, Enterobacter sp. and Bacillus cereus.
Positivity was obtained in prototypes of rapid tests sensitized with Polyclonal Anti-InlB. Positivity
was observed in samples containing culture medium and newly cultured bacteria, validating the
methodology used in the development of the test. The detection capacity of the test at D
concentration is 2x10 4 CFU / mL. / A listeriose é uma infecção bacteriana, provocada por Listeria monocytogenes, uma bactéria
transmitida principalmente pela ingestão de alimentos contaminados. É o principal agente
responsável pelas infecções alimentares com baixa taxa de morbidade, porém quando a infecção
ocorre em imunodeprimidos os índices de mortalidade são elevados, representando um importante
problema de saúde pública. Os métodos disponíveis para a identificação da presença de Listeria
monocytogenes incluem o isolamento da bactéria através de cultivo convencional, que consiste em
um método laborioso, demorado e de baixa sensibilidade e métodos moleculares e/ou imunológicos, normalmente complexos, de custo elevado, requerendo equipamentos e pessoal
treinado. Portanto, a busca por métodos alternativos, rápidos, sensíveis e específicos para a
detecção da presença de Listeria monocytogenes em alimentos, é útil e necessária para prevenção
da infecção e de grande valia para reduzir a taxa de mortalidade nos imunodeprimidos, bem como,
viabilizar a vigilância epidemiológica desta enfermidade. Os objetivos do trabalho foram:
Desenvolver teste imunocromatográfico de fluxo lateral para identificação de L. monocytogenes
em alimentos; Avaliar o desempenho do teste imunocromatográfico de fluxo lateral utilizando
amostras de alimentos naturalmente e artificialmente contaminados com L. monocytogenes. Como
agente de detecção, foi impregnado à fibra de vidro o monoclonal MAb-2D12 anti-internalina-A
conjugado ao ouro coloidal. Como agente de captura, foi sensibilizado, em papel de nitrocelulose,
a linha teste com anticorpo policlonal anti-internalina-B, e na linha controle com proteína A, para
validar a atividade do agente de detecção. Inóculos de cepas padrões de Listeria monocytogenes
foram utilizados para avaliação da detecção Listeria no teste proposto. Como controle negativo,
utilizamos cepas de Listeria innocua, Enterobacter sp. e Bacillus cereus. Foi obtido positividade
em protótipos de testes rápidos sensibilizados com policlonal anti-InlB. Observou-se positividade
em amostras contendo meio de cultura e a bactéria recém cultivada, validando a metodologia
empregada no desenvolvimento do teste. A capacidade de detecção do teste foi de 2x10 4 UFC/mL.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/8319 |
| Date | 27 February 2018 |
| Creators | Silva Filho, Ernandes da |
| Contributors | Bührer, Samira, Kipnis, André, Bührer, Samira, Souza, Guilherme Rocha Lino de, Moura, Rodrigo Scaliante de, André, Maria Cláudia Dantas Porfírio Borges, Pinto, Emerith Mayra Hungria |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Medicina Tropical e Saúde Publica (IPTSP), UFG, Brasil, Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - IPTSP (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 6085308344741430434, 600, 600, 600, 600, -7769011444564556288, -3215531234980696747, -2555911436985713659 |
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