Plyšinių jungčių kanalai yra sudaryti iš koneksinų baltymų, kurie yra randami įvairiuose audiniuose ir dėka jų ląstelės gali keistis metabolitais bei elektriniais signalais. Plyšinių jungčių kanalai pasižymi dideliu jautrumu viduląsteliniam pH. Šiame darbe tyrėme įvairių inhibitorių poveikį homotipinių plyšinių jungčių, sudarytų iš Cx26, Cx30.2, Cx36, Cx40, Cx43, Cx45, Cx46, Cx47 ir Cx50 laidumui bei šio poveikio priklausomybę nuo viduląstelinio pH.. Plyšinių jungčių blokatoriais buvo pasirinktos kelias skirtingas farmakologines grupes atstovaujančios medžiagos: ilgagrandžiai alkoholiai (heksanolis, oktanolis, nonanolis), izofluranas, meflokvinas, flufenaminė rūgštis, karbenoksolonas ir arachidono rūgštis. Pademonstravome, kad pHi pakėlimas panaudojant NH4Cl iki ~8 didino plyšinių jungčių laidumą tarp ląstelių, turinčių Cx30.2 ar Cx45, tačiau neturėjo jokios įtakos ląstelėms su Cx26, Cx40, Cx46, Cx47 ir Cx50 ir mažino laidumą tarp ląstelių su Cx36 ar Cx43. pHi padidinimas žymiai susilpnino ilgagrandžių alkoholių, izoflurano ir meflokvino poveikį Cx45 plyšinių jungčių laidumui ir neturėjo įtakos flufenaminės rūgšties, karbenoksolono ir arachidono rūgšties poveikiui. Taip pat parodėme, kad nuo pHi priklauso oktanolio poveikio Cx45 plyšinių jungčių laidumui galingumas, t.y., pusinė blokavimo koncentracija IC50 buvo 0.1, 0.25 ir 2.68 mM atitinkamai prie pHi 6.9, 7.2 ir 8.1. Manoma, kad pH poveikis plyšinių jungčiu laidumui pasireiškia protonams jungiantis su koneksino baltymo... [toliau žr. visą tekstą] / Gap junction channels formed from connexin proteins provide a direct pathway for electrical and metabolic cell-cell communication exhibiting high sensitivity to intracellular pH. We examined pHi-dependent modulation of junctional conductance of GJs formed of Cx26, Cx30.2, Cx36, Cx40, Cx43, Cx45, Cx46, Cx47 and Cx50 by reagents representing several distinct groups of uncouplers, such as long carbon chain alkanols, arachidonic acid, carbenoxolone, isoflurane, flufenamic acid and mefloquine. We demonstrate that alkalization by NH4Cl to pH≈8 increased coupling in cells expressing Cx30.2 and Cx45, yet did not affect coupling of Cx26, Cx40, Cx46, Cx47 and Cx50 and decreased it in Cx43 and Cx36 gap junctions. Unexpectedly, cells expressing Cx45, but not other connexins, exhibited full coupling recovery after alkalization with NH4Cl under the continuous presence of alkanols, isoflurane and mefloquine. There was no coupling recovery by alkalization in the presence of arachidonic acid, carbenoxolone and flufenamic acid. In cells expressing Cx45, IC50 for octanol was 0.1, 0.25 and 2.68 mM at pHis of 6.9, 7.2 and 8.1, respectively. Histidine modification of Cx45 protein by N-bromosuccinimide proportionally reduced the coupling-promoting effect of NH4Cl as well as uncoupling effect of octanol. This suggests that long chain alkanols and some other uncouplers may act through the formation of hydrogen bonds with the as-of-yet unidentified histidine/s of the Cx45 gap junction channel protein... [to full text]
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LABT_ETD/oai:elaba.lt:LT-eLABa-0001:E.02~2011~D_20110628_152125-97415 |
| Date | 28 June 2011 |
| Creators | Skeberdytė, Aistė |
| Contributors | Skeberdis, Arvydas, Benetis, Raimondas, Tarasevičius , Eduardas, Lukošius , Audronis, Janulis , Valdimaras, Ivanauskas , Liudas, Savickas , Arūnas, Briedis , Vitalis, Ramanauskienė , Kristina, Radžiūnas , Raimondas, Pečiūra , Rimantas, Gumbrevičius , Gintautas, Rodovičius , Hiliaras, Lithuanian University of Health Sciences |
| Publisher | Lithuanian Academic Libraries Network (LABT), Lithuanian University of Health Sciences |
| Source Sets | Lithuanian ETD submission system |
| Language | Lithuanian |
| Detected Language | English |
| Type | Master thesis |
| Format | application/pdf |
| Source | http://vddb.laba.lt/obj/LT-eLABa-0001:E.02~2011~D_20110628_152125-97415 |
| Rights | Unrestricted |
Page generated in 0.0027 seconds