Les transsections nerveuses peuvent conduire à une perte de sensibilité tactile et une paralysie complète. Malheureusement, peu d’options s’offrent aux cliniciens. L’autogreffe nerveuse, le standard en clinique, induit un déficit au site de prélèvement en plus d’induire une récupération fonctionnelle incomplète. Une alternative est d’utiliser des conduits nerveux faits de biomatériaux pour guider la migration axonale, mais ceux-ci comportent plusieurs limites cliniques. Notre objectif est de fabriquer un tube nerveux (TN) vivant complètement autologue dans lequel un réseau de capillaires sera développé in vitro par ensemencement de cellules endothéliales (CE), afin de favoriser une vascularisation rapide du greffon, ainsi que de cellules de Schwann (CS), pour permettre une croissance optimale des neurites et favoriser la migration axonale. Le TN est composé d’un feuillet de fibroblastes avec CE enroulé sur lui-même pour former un tube plein et enrichi en CS. Les TN humains sont implantés chez des rats RNU immunodéficients pour combler un déficit du nerf sciatique de 15 mm. Le remodelage du greffon est suivi en quantifiant la migration axonale par marquage en immunofluorescence des neurofilaments L après 2, 4 et 8 semaines d’implantation. Les TN ont été implantés avec succès chez le rat et leur structure interne a rapidement été remodelée. Une revascularisation des tubes sur toute leur longueur a été observée dès la 4ᵉ semaine d'implantation, y compris dans les tubes non endothélialisés. Les fibres nerveuses ont reconnecté avec le segment distal du nerf lésé à 8 semaines, la migration axonale étant similaire à celle de l'autogreffe en proximal. En produisant des tubes vivants entièrement autologues susceptibles de libérer des facteurs de croissance neurotrophiques et d’accélérer la vascularisation du greffon grâce à un réseau microvasculaire préétabli, nous espérons développer une nouvelle approche thérapeutique personnalisée pour améliorer le traitement des blessures des nerfs périphériques / Even with recent advancements, the treatment of peripheral nerve transections remains a challenge. Peripheral nerve transections may lead to loss of sensibility and motor function of the upper and lower limbs. Unfortunately, clinicians only have few options to repair the gap. Our goal is to produce a fully autologous scaffold-free nerve tube (NT) to guide axonal migration. A viable pre-vascularized tube seeded with Schwann cells (SCs) could allow a faster recovery for patients with major peripheral nerve transections by supporting an optimal axonal migration. NT’s are made from fibroblast cells which deposit their own extracellular matrix into a manipulable sheet, on which are seeded endothelial cells (ECs) and SCs to form a filled tubular structure, a technique based on the self-assembly method. NTES were implanted in immunodeficient RNU rats to repair a 15 mm sciatic nerve defect. Graft innervation was followed by quantification of axon migration using immunofluorescent staining of neurofilament L after 2, 4 and 8 weeks post-implantation. The internal structures of the NTES rapidly remodeled and successfully reconnected with the proximally severed nerve segment. Immunofluorescent labelling of rat neurites indicates that nerve fibers migrated through the construct and reached the distal nerve stump after 8 weeks. Furthermore, myelinated fibers were detected in the NTES. In its proximal section, axonal migration was similar to the autograft control. Also, revascularization was noted along the entire tube length as soon as the 4ᵗʰ week after implantation. The anastomosis of the pre-established human capillaries was successful. Indeed, rat red blood cells were identified in the lumen of human capillaries within the NT graft. Pre-vascularized NT’s with autologous ECs have the potential to greatly accelerate revascularization in the graft and thereby provide oxygen and nutriments during the process of nerve regeneration. Moreover, SC may release neurotrophic factors that can enhance peripheral nerve regeneration.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/67565 |
| Date | 22 February 2021 |
| Creators | Thibodeau, Alexane |
| Contributors | Berthod, François, Khuong, Hélène Thida |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | mémoire de maîtrise, COAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrise |
| Format | 1 ressource en ligne (xii, 77 pages), application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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