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Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leucemia linfoblástica aguda de células T (LLA-T) e o linfoma linfoblástico de
células T (LL-T) são proliferações malignas de precursores de células T em
diferentes estágios de maturação. LLA-T e LL-T são considerados atualmente duas
formas de uma mesma doença, a leucemia/linfoma linfoblástico de células T (LLL-T),
por compartilharem características morfológicas, imunofenotípicas e genéticas.
Como os blastos de LLL-T apresentam características similares às de timócitos
normais, moléculas envolvidas na migração destas células podem também estar
envolvidas na migração ou homing dos linfoblastos no curso da doença. Neste
sentido, foi demonstrado recentemente que o receptor 1 de esfingosina-1-fosfato
(S1P1) é essencial para a saída de timócitos do timo. No presente estudo, decidimos
avaliar a expressão e o papel do S1P1 na migração de quatro linhagens celulares de
LLA-T (HPB-ALL, MOLT-4, CEM e JURKAT) em resposta ao seu ligante fisiológico,
a esfingosina-1-fosfato (S1P). Observamos que a linhagem HPB-ALL apresentou
baixa expressão de RNAm de S1P1, enquanto MOLT-4 e JURKAT apresentaram
uma expressão mediana e CEM apresentou altos níveis de expressão de RNAm
para este receptor. Em ensaios funcionais de migração celular observamos que a
capacidade migratória das linhagens frente a S1P foi diretamente relacionada ao
nível de expressão gênica do receptor. A S1P induziu a migração das linhagens
analisadas em diferentes concentrações até 100 nM, e inibiu a migração quando
aplicada em altas concentrações (1000 nM). As respostas migratórias foram
acompanhadas pela modulação do citoesqueleto de actina. Dependendo da
concentração de S1P utilizada, observamos polimerização (menores concentrações)
ou despolimerização (maiores concentrações) da actina. Além disso, o prétratamento
das células com W146 (inibidor de S1P1) bloqueou a migração das
linhagens frente à S1P em menores concentrações e induziu a migração frente à
S1P em altas concentrações, sugerindo que a migração seja especificamente
mediada por S1P1. Nossos resultados sugerem que as interações mediadas por
S1P/S1P1 modulam a migração não apenas de precursores de células T normais,
mas também de linfoblastos de LLL-T. Desta forma, a interação S1P/S1P1 pode ser
considerada como alvo para possíveis estratégias terapêuticas frente a estas
neoplasias. / T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) and T-cell lymphoblastic lymphoma (TLBL)
are malignant proliferations of T cell precursors at different stages of normal
development. T-ALL and T-LBL are presently believed to represent two different
forms of a single disease, the T-cell lymphoblastic leukemia/lymphoma (T-LLL), as
they share morphological, immunophenotypic and genetic features. As T-LLL
lymphoblasts present similar characteristics of normal T cell precursors, molecules
involved on the migration of these cells might also be associated with migration and
homing of T-ALL/LBL. In this context, the sphingosine-1-phosfate receptor 1 (S1P1),
has been described as essential for mouse thymocyte migration and thymic egress.
Herein, we evaluated the expression and role of S1P1 in four T-ALL cell lines (HPBALL,
MOLT-4, CEM e JURKAT) in response to its physiological ligand, the
sphingosine-1-phophate (S1P). We observed that HPB-ALL cells presented low
expression levels of S1P1 mRNA, whereas MOLT-4 and JURKAT had medium levels
and CEM showed high levels of S1P1 expression. In functional migration assays, we
observed that the migratory response of the cells towards S1P was directly related
with their expression levels of the receptor. S1P induced the migration of the cell
lines analyzed in different concentrations up to 100 nM and inhibited cell migration at
higher concentrations (1000 nM). Moreover, migratory responses were accompanied
by the modulation of actin cytoskeleton. Depending on S1P concentrations, we
observed actin polymerization (lower concentrations) or depolymerization (higher
concentrations). Pre-treatment of the cells with W146 (a S1P1 inhibitor) blocked S1Pinduced
migration at lower concentrations but induced migration towards S1P at high
concentrations, suggesting that the migration is specifically mediated by S1P1. Our
results suggest that interactions mediated by S1P/S1P1 can modulate cell migration
of T-LLL blasts similarly to their normal T cell precursor counterparts. Accordingly,
immune intervention upon this ligand/receptor interaction may be envisioned as a
potential therapeutic strategy for these malignancies.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/7059 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Messias, Carolina Valença |
| Contributors | Faria Neto, Hugo Caire de Castro, Bueno, Valquíria, Viola, João Paulo de Biaso, Almeida, Vinicius Cotta de, Lima, Alexandre Morrot, Cruz, Daniella Arêas Mendes da, Savino, Wilson |
| Publisher | Instituto Oswaldo Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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