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Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leptospirose é uma doença zoonótica causada por bactérias do gênero Leptospira sp. A ausência de um teste diagnóstico rápido e confiável dificulta o diagnóstico precoce e o acesso ao impacto da leptospirose na saúde pública. O Teste de Microaglutinação, considerado padrão-ouro pela Organização Mundial de Saúde, é realizado em poucos laboratórios de referência no mundo e, apesar de altamente específico, apresenta baixa sensibilidade na fase inicial da doença. O objetivo do presente estudo foi identificar novos alvos proteicos a serem empregados como marcadores diagnósticos para leptospirose. Para tal, foi construído um microarranjo de proteínas compreendendo 61% do genoma codificante de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni e investigou-se a resposta por anticorpos IgG de 274 indivíduos, sendo 80 pacientes em fase aguda da doença, 80 em fase convalescente e 114 indivíduos saudáveis provenientes de área com transmissão endêmica e não endêmica para doença
Foram encontrados 16 antígenos capazes de identificar casos agudos de leptospirose e 18 capazes identificar casos convalescentes. Entre estes, antígenos como LipL32 e os domínios das proteínas Lig já foram previamente descritos como sendo reconhecidos por soros de pacientes humanos, atuando como prova de conceito para a plataforma de microarranjo proteico. Novos antígenos também foram identificados no estudo, como a proteína hipotética LIC10215, que mostrou alta acurácia na identificação de casos agudos e convalescentes de leptospirose. Os antígenos imunodominantes identificados demonstram potencial uso no desenvolvimento de novos ensaios diagnósticos e no melhoramento dos testes diagnósticos disponíveis no mercado. Estudos complementares serão realizados para avaliar o desempenho desses antígenos nos formatos de ELISA e/ou de teste rápido / Leptospirosis is a zoonotic disease
caused by bacteria of the genus
Leptospira
sp. The lack of
a rapid and reliable point-of-care diagnostic test
is a major barrier not only to assess the global
burden of the disease but also to provide an ear
ly diagnosis. Despite the
high specificity of the
microaglutination test, which is
the gold standard test for di
agnosing leptospirosis according
to the World Health Organization, it presents low sensitivity and is performed in few
reference laboratories worldwide. Therefore, the
aim of this work was to identify new protein
targets to be used as diagnostic markers for leptospirosis. Accordingly, we developed a
protein microarray chip comprising 61% of the
Leptospira interrogans
serovar Copenhageni
coding genome and investigated the IgG
response of 274 individuals, including 80
convalescent- and 80 acute-ph
ase patients and 114 healthy i
ndividuals from areas with
endemic and non-endemic transmission of the dis
ease. We found 16 antigens that identified
acute leptospirosis cases and 18 antigens that
identified convalescent cases. Among these
antigens are LipL32 and the unique domains of
the Lig proteins, which have already been
described as seroreactive antigens among leptos
pirosis patients, thus acting as a proof-of-
concept for the protein microarray platform. Nove
l antigens were also identified in this study,
such as the hypothetical protein LIC10215, that
showed high diagnostic accuracy for both
acute and convalescent cases. The imunodominant
antigens identified here are potential
candidates for the development of new diagnosti
c assays as well as for the improvement of
currently available tests. Further studies are needed to evaluate their performance in ELISA
and rapid test platforms
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/13345 |
| Date | January 2013 |
| Creators | Aquino, Carolina Lessa |
| Contributors | Krieger, Marco Aurelio, Dellagostin, Odir, Mota, Fábio Faria da, Ferreira, Ana Gisele da Costa Neves, Souza, Cláudio Marcos Rocha de, Medeiros, Marco Alberto, Galler, Ricardo |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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