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Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A sepse é uma das principais doenças causadoras de óbitos em unidades de tratamento intensivo. Ademais, a forma grave dessa síndrome induz uma imunossupressão prolongada que causa diversas complicações, a maior parte dessas relacionadas a infecções pulmonares. O conhecimento atual sobre a imunossupressão induzida por sepse grave é muito limitado; no entanto já foi demonstrado que esta condição induz disfunções em linfócitos T CD4 e células dendríticas devido a alterações epigenéticas. O objetivo do presente trabalho foi o de estudar os linfócitos T \03B3\03B4 no pulmão durante a sepse grave assim como possíveis dinfunções destas células durante a imunossupressão pós-sepse. Para isso, a sepse grave foi induzida em camundongos C57BL/6 através da ligação e perfuração do ceco (CLP; 9 perfurações com agulha de 21 gauge e tratamento com antibiótico por 3 dias), modelo experimental descrito por ser capaz de desencadear e manter um estado de imunossupressão. No primeiro dia após a CLP os números de linfócitos T \03B3\03B4 e \03B1\03B2 se encontram elevados no pulmão. No 3º dia, o número de linfócitos T \03B1\03B2 retornou a níveis basais, no entanto, os números de linfócitos T \03B3\03B4 continuaram elevados. A análise por citometria de fluxo da expressão de anexina V, CD25, e c-Fos, sugere que este número aumentado de linfócitos T \03B3\03B4 no 3º dia após CLP seja devido a uma rápida e duradoura proliferação destas células em órgãos linfóides secundários e não devido a uma diminuição da morte celular, evento característico da sepse.
De modo interessante, o aumento da expressão de CD25 por linfócitos T \03B3\03B4 foi observada tanto no pulmão (3º e 10º dia após CLP) quanto no baço (1º, 3º e 10º dia após CLP), em tempos anteriores aos observados para os linfócitos T \03B1\03B2. No 10º dia após a CLP, os camundongos já se encontram recuperados da sepse, contudo, os linfócitos T \03B3\03B4 e \03B1\03B2 apresentam uma incapacidade de migrar em direção ao pulmão inflamado, como foi observado em ensaio de transferência adotiva. Em contrapartida, no 10º dia, um maior número de linfócitos T \03B3\03B4 (mas não \03B1\03B2) recuperados do pulmão de animais pós-sépticos estão produzindo IL-17, enquanto há um menor número de linfócitos T \03B3\03B4 IL-10+ ou IFN- \03B3+. Este aumento na produção de IL-17 foi acompanhado de um aumento do número de neutrófilos. Em síntese, esses dados sugerem que, diferente dos linfócitos T \03B1\03B2, os linfócitos T \03B3\03B4 apresentam um perfil pró-inflamatório durante a imunossupressão pós-sepse grave induzida por CLP. / Sepsis is a major cause of death at intensive care
units. Severe sepsis also leads to systemic
long-term immunosuppression, which causes several c
omplications, most of them related to lung
infections. The current knowledge about sepsis-indu
ced immunosuppression is poor; however it
has been demonstrated that post-septic mice present
dendritic and CD4 T cells dysfunction caused
by epigenetic changes. In the present work, we aime
d to investigate lung
γδ
T cells during severe
sepsis and whether these cells were immunocompetent
during immunosuppression post-sepsis.
For that, severe sepsis was induced in C57BL/6 mice
by cecal ligation and puncture (CLP; 9
punctures with 21 gauges needle and antibiotics tre
atment for 3 days), a model previously
described as triggering and maintaining immunosuppr
ession. One day after CLP, both
γδ
and
αβ
T
lymphocyte numbers were increased in lung tissue. A
t day 3,
αβ
counts return to basal levels due
to a post-sepsis apoptotic event; however,
γδ
T cell numbers remained elevated. This phenomenon
seems to be due to an early and long-lasting prolif
eration of
γδ
T cells (as compared to
αβ
),
instead of to decreased cell death rate, as assesse
d by flow cytometry using annexin V, CD25, and
c-Fos staining. Interestingly, the increase in CD25
expression by
γδ
T cells was observed in lung
(3
rd
and 10
th
days post-CLP) and spleen (1
st
, 3
rd
and 10
th
day post-CLP), at early time points than
the ones observed for
αβ
T cells. At the 10
th
day after CLP, mice were recovered from sepsis, bu
t
splenic
γδ
and
αβ
T cells showed a disability to migrate towards inf
lamed lung in a cell adoptive
transfer assay. Nevertheless, during day 10
th
, lung
γδ
T cells (but not
αβ
T cells) recovered from
post-septic mice produced increased IL-17 levels, w
hereas decreased the production of IFN-
γ
and
IL-10, showing a Th17-like response. The increased
IL-17 production was accompanied by
neutrophil infiltration in the lungs. In summary, t
hese data suggest that, in contrast to other T
lymphocytes,
γδ
T cells seem to maintain an effective immune-respo
nse in the lungs during severe
sepsis-induced immunosuppression caused by CLP.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/12856 |
| Date | January 2010 |
| Creators | Bornstein, Victor Ugarte |
| Contributors | Pons, Andrea Henriques, Gomes, Rachel Novaes, Figueiredo, Rodrigo Tinoco, Benjamim, Claudia Farias, Souza, Mariana Conceição de, Penido, Carmen, Henriques, Maria das Graças |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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