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Estudo da partiÃÃo de imunoglobulina G em sistemas aquosos bifÃsicos utilizando PEG/tampÃo citrato / Partition study of immunoglobulin G in aqueous two-phase systems using PEG/citrate buffer

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Neste trabalho, estudou-se a extraÃÃo de Imunoglobulina G (IgG) em Sistemas Aquosos BifÃsicos (SABs) compostos por polietilenoglicÃis (PEG) com massas moleculares iguais a 4000, 6000 e 8000 g.mol-1 e tampÃo citrato com pHs 5,0, 6,0 e 7,0. Primeiramente, determinou-se o comportamento no equilÃbrio para cada sistema por duas metodologias diferentes: cloud-point, a partir do qual foram obtidas as curvas binodais, e densitometria, que deu origem Ãs linhas de amarraÃÃo. Os resultados obtidos por ambas as tÃcnicas apresentaram uma boa concordÃncia. Observou-se que o aumento da massa molar do PEG, bem como o aumento do pH do tampÃo citrato levou a um aumento da Ãrea sobre a curva binodal. Entretanto, para o Ãltimo caso, a expansÃo da regiÃo bifÃsica nÃo foi significante quando se aumentou o pH de 6,0 para 7,0. Em relaÃÃo Ãs linhas de amarraÃÃo, tambÃm nÃo foram observadas mudanÃas significativas tanto no comprimento como nas inclinaÃÃes das mesmas quando se variou a massa molar e o pH, o que mostra a alta capacidade dos Ãons citrato em se hidratar preferencialmente e promover quase totalmente ou totalmente a exclusÃo do PEG da fase fundo, como observado nesse trabalho. O estudo de partiÃÃo se deu a partir de um planejamento estatÃstico do tipo 24 com resoluÃÃo completa e adiÃÃo de trÃs pontos centrais, tendo como variÃveis a % PEG, % tampÃo citrato, pH e massa molar do PEG. Para tal finalidade o software Statistica 7 foi utilizado. Foram realizados 19 experimentos e cada variÃvel independente foi testada em trÃs nÃveis, sendo os valores de porcentagem de PEG iguais a 26, 28 e 30% m/m e de tampÃo citrato iguais 8, 10 e 12% m/m. Os experimentos que apresentaram os maiores valores de coeficiente de partiÃÃo (Kp) foram aqueles com pH 7,0 e 12% de tampÃo citrato, classificados como fatores significativos estatisticamente. Fixaram-se, entÃo, esses valores de pH e % de tampÃo citrato e realizaram-se mais 27 experimentos com diferentes concentraÃÃes de NaCl (0, 0,2 e 0,4 M). Observou-se um aumento no valor de Kp quando se aumentou a concentraÃÃo de NaCl. Os resultados apresentados neste estudo mostraram que elevados valores de Kp podem ser obtidos mesmo a baixas concentraÃÃes de sal neutro. Este resultado mostrou ser satisfatÃrio visto que a utilizaÃÃo de grandes concentraÃÃes de sais em um processo industrial pode ocasionar diversos problemas como, por exemplo, a reduÃÃo na vida Ãtil dos equipamentos devido à corrosÃo dos mesmos. / In this work, it was studied the extraction of immunoglobulin G (IgG) in Aqueous Two Phase Systems (ATPS) composed of polyethylene glycols (PEG) with molecular weight equal to 4000, 6000 and 8000 g.mol-1 and citrate buffer with pH 5.0, 6.0 and 7.0. First, the behavior for each system in equilibrium was determined by two different methodologies: cloud-point from which binodal curves were obtained and density, which led to the tie-lines. The results obtained by both techniques showed good agreement. It was observed that the increase in PEG molecular weight and the increase in citrate buffer pH led to an increase in the area of the binodal curve. However, for the latter case, the expansion of two-phase region was not significant when the pH increased from 6.0 to 7.0. Regarding the tie-lines, there were also no significant changes in both length and slopes of the same while varying the molecular weight and pH, which shows the high ability of citrate ions on hydrating theirselves preferably and promoting fully or almost fully the PEG exclusion bottom phase, as observed in this study. The study of partition was made from a statistical design of type 24 with complete resolution and adding three central points, having as variables % PEG, % citrate buffer, pH and PEG molar mass. For this purpose the software Statistica 7 was used. 19 experiments were performed and each independent variable was tested in three levels, being the values of PEG percentage equals to 26, 28 and 30% (m/m) and citrate buffer percentage equals to 8, 10 and 12% (w/w). The experiments showed that the highest values of the partition coefficient (Kp) were obtained in systems with pH 7.0 and 12% citrate buffer, classified as statistically significant factors. These values of pH and % citrate buffer were settled and other 27 experiments were conducted with different concentrations of NaCl (0, 0.2 and 0.4 M). There was an increase in the Kp value when the NaCl concentration increased. The results of this study showed that high Kp values can be obtained even at low concentrations of neutral salt. This result is satisfactory since the use of high concentrations of salts in an industrial process may cause various problems such as the reduction in service life due to corrosion of the equipment thereof.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:8281
Date28 February 2013
CreatorsAna Alice de FÃtima Nunes Torres
ContributorsIvanildo Josà da Silva Junior, Andrà Casimiro de Macedo, Amaro Gomes Barreto JÃnior
PublisherUniversidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Engenharia QuÃmica, UFC, BR
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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