Avaliamos os efeitos da glicose elevada (HG, 25 mM) sobre a expressão do microRNA miR-31 em fibroblastos dérmicos obtidos de ratos normoglicêmicos e hiperglicêmicos (30 dias após indução do Diabetes Mellitus com estreptozotocina) e em linhagem de fibroblastos NIH-3T3, cultivadas em baixa concentração de glicose (5 mM) ou HG durante 3 dias. O papel do estresse oxidativo foi avaliado com a adição do antioxidante N-acetil cisteína (NAC) ao meio. A expressão de miR-31 foi estudada por RT-PCR e o comportamento migratório foi avaliado por vídeos. A expressão de miR-31 aumentou 3 vezes em fibroblastos de ratos hiperglicêmicos, enquanto em NIH-3T3 a HG aumentou a expressão de miR-31 em 50 %. Nestas células, o NAC preveniu a elevação de miR-31 e alguns dos efeitos da HG sobre a migração celular. A expressão exógena de miR-31 reproduziu parcialmente o fenótipo de células expostas à HG. Conclusão: HG aumenta a expressão de miR-31 em fibroblastos, contribuindo para a migração deficiente destas células no Diabetes Mellitus. / We evaluated the effects of high glucose (HG, 25 mM) on the expression of microRNA miR-31 in dermal fibroblasts obtained from normoglycemic and hyperglycemic rats (30 days after Diabetes Mellitus induction with streptozotocin) and NIH-3T3 fibroblasts, cultured under low glucose concentration (5 mM) or HG for 3 days. The role of oxidative stress was evaluated with the addition of the antioxidant N-acetyl cysteine (NAC) in the medium. The expression of miR-31 was studied by RT-PCR and cell migration was assessed by videos. The expression of miR-31 increased 3-fold in fibroblasts derived from hyperglycemic rats, and in NIH-3T3 cells HG increased miR-31 expression by 50%. In these cells, NAC prevented the elevation of miR-31 and some of the deleterious effects of HG on cell migration. Exogenous expression of miR-31 partially reproduced the phenotype of cells exposed to HG. Conclusion: HG increases the expression of miR-31 in fibroblasts, contributing to the impairment of migration of these cells observed in Diabetes Mellitus.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:usp.br/oai:teses.usp.br:tde-08122015-175745 |
| Date | 31 August 2015 |
| Creators | Gomes, Cibele Crastequini |
| Contributors | Santos, Marinilce Fagundes dos |
| Publisher | Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP |
| Source Sets | Universidade de São Paulo |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | Dissertação de Mestrado |
| Format | application/pdf |
| Rights | Reter o conteúdo por motivos de patente, publicação e/ou direitos autoriais. |
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