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SÉRGIO MENEZES AMARO FILHO.pdf: 3118907 bytes, checksum: 5ace372e7cf9ac4518a96c77052798ac (MD5)
Previous issue date: 2012-03-30 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O câncer cervical é o terceiro tipo de câncer mais comum entre mulheres no mundo.
Dentre outros cofatores, a infecção pelo HPV de alto risco, tem sido bem documentada
como fator necessário ao desenvolvimento desse tipo de câncer. A principal ação do
HPV envolve a expressão massiva das oncoproteínas virais E6 e E7 que podem formar
complexos específicos com proteínas supressoras de tumor, sendo capazes de alterar
mecanismos do ciclo celular, modificando a expressão de proteínas celulares. Um dos
principais avanços na medicina clínico patológica é o uso dessas proteínas como
marcadores de forma a aumentar a acurácia do prognóstico e do próprio estadiamento
do câncer cervical. Assim, a fim de reforçar a hipótese de que as proteínas associadas ao
ciclo celular Ki-67, MCM-2, p53 e p16INK4a se encontram superexpressas no câncer
cervical, foram analisadas em 87 amostras cervicais de pacientes com câncer invasivo
(CCI) e 43 cérvix normais. Verificamos também se há uma expressão diferencial que
pode ajudar a avaliação do estadiamento clínico da FIGO e quais tipos virais podem
induzir a uma expressão diferencial dessas proteínas. Além disso, características
sociodemográficas, comportamentais e clínicas das pacientes foram obtidas dos
prontuários e analisadas. Para isso, a detecção de DNA de HPV foi realizada pela
técnica da PCR e hibridização in situ. A expressão das proteínas foi observada por
imunohistoquímica, seguida por quantificação manual e através do software ImagePro
Plus. A análise estatística foi feita utilizando o software STATA/SE 10.1 aplicando os testes: Kruskall-Wallis, Student, Fisher e Qui-Quadrado. Nossos resultados mostraram
forte associação (p<0,05) do CCI e dos estágios tumorais mais avançados (III e IV) com
mulheres superiores a 55 anos, com mais de quatro gestações e sem escolaridade. A
prevalência de DNA de HPV por PCR na população total foi de 73,4%. Nos grupos de
CCI e controle foram, respectivamente, 94,3% e 29,3%. O tipo mais prevalente foi o
HPV16 (70,8%), acompanhado pelo HPV33 (11,2%) e 35 (4,5%). Como esperado, foi
observado aumento (p<0,05) na expressão de Ki-67, MCM-2, p53 e p16INK4a no CCI,
quando comparados ao controle. A proteína p16INK4a com expressão difusa,
citoplasmática e nuclear esteve associada ao câncer. Ki-67 apresentou forte expressão
(>50%) conforme o agravamento da doença. Não foi observada associação entre a
expressão de MCM-2, p53 e p16, e o estadiamento do tumor. Como conclusões, foram
observadas maiores chances no desenvolvimento do CCI em mulheres com idades
superiores a 55 anos, com mais de quatro gestações e sem escolaridades, estando esses
fatores associados, também, à progressão tumoral. Apenas o marcador Ki-67 associouse
ao estágio do CCI. Os tipos mais prevalentes encontrados, HPV16, 33, 35, 67 e 58,
sugerem que novos estudos devam ser considerados para implementação de vacinação
contra o HPV no Brasil. / Cervical cancer is the thrid most common cancer among women worldwide. Beside
others cofactors, infection with high risk HPV has been well documented as a necessary
cause for cancer development. The main action involves the expression of massive HPV
E6 and E7 viral oncoproteins that can form specific complexes with tumor suppressor
proteins that are able of changing mechanisms of the cell cycle, modifying the
expression of cellular proteins. One of the major advances in medicine clinical
pathology is the use of these proteins as markers in order to improve the accuracy of
prognosis and the cervical cancer stages. Thus, in order to reinforce strengthen the
hypothesis that the proteins involved in cell cycle Ki-67, MCM-2, p53 and p16INK4a are
over expressed in the uterine cervix of patients with cervical cancer, we analyzed 87
samples from patients with invasive cervical cancer (ICC) that were compared with 43
normal cervices (controls). Was verified also whether there is a differential expression
that can help to assess the FIGO staging for ICC and which HPV viral types can induce
a differential expression of these proteins. Moreover sociodemographic, behavioral and
clinical characteristics of patients were obtained from medical records and analyzed.
Therefore, the detection of HPV DNA was performed by PCR and in situ hybridization.
By means of immunohistochemistry the expression of Ki-67, MCM2, p53 and p16 were
analyzed. Statistical analysis was performed using STATA / SE 1.10 by applying the
Kruskal-Wallis test, T-Student, chi-square and Fisher. Our results showed a strong
correlation (p<0.05) of the CCI and the later stages of the cancer in women over 55
years, more than four pregnancies and no school education. The overall HPV DNA
prevalence was 73.4%. On the ICC group and control group the prevalence was,
respectively, 94.3% and 29.3%. The most prevalent HPV types were HPV16 (70.8%),
HPV33 (11.2%) followed by HPV 35 (4.5%). Women with HPV16 were associated
with advanced age (50.8 years) compared to women with other types (58.2 years). As
expected, was observed an increase in Ki-67, MCM-2, p53 and p16 expression in CCI
(p<0.05), compared to control. The expression of p16 protein with diffuse cytoplasmic
and nuclear staining was associated with cancer. The Ki-67 showed a strong expression
(> 50%) as the later stage of the disease. There was no association between the
expression of MCM-2, p53 and p16 and tumor staging. In conclusion, we observed
higher risks of ICC development in older ages, multiple pregancies and no school
education. Only the Ki-67 marker was associated with the stage of the ICC. The most
prevalent HPV types found, HPV 16, 33, 35, 67 and 58, suggest that new studies should
be evaluated and considered on implementation of HPV vaccination in Brazil.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/7008 |
| Date | January 2012 |
| Creators | Amaro Filho, Sérgio Menezes |
| Contributors | Moraes, Milton Ozório, Levi, José Eduardo, Russomano, Fábio Bastos, Andrade, Cecília Vianna de, Pereira, Luiza de Oliveira Ramos, Nicol, Alcina Frederica, Pirmez, Claude |
| Publisher | Instituto Oswaldo Cruz |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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