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Previous issue date: 2014-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Factors regulating apoptosis can determine the oocyte viability; however there are few studies about the genes of these factors and their action in the antral follicles cumulus-oocyte complex (COC) development, neither about the relationship with Leptin (LEP) and its receptor (LEPR) in sheep. The aim of this study was evaluate the mRNA expression of LEP, LEPR, and the apoptotic regulating factors (Bcl-2, Bax, p53 and caspase 3), in oocytes (OO) and cumulus cells (CC) from different sizes of antral follicles. Twenty pools of OO (20 unities) and of CC (from 20 COC) harvested from follicles > 3 mm and ≤ 3 mm were evaluated. The gene expression was determined after mRNA extraction and further cDNA amplification by real time PCR. Bcl2, p53 and caspase 3 genes were expressed in all cells and follicles size. Bax expression was observed only in OO. LEP and LEPR were expressed only in CC. The expression of apoptosis promoting factors was higher in OO > 3mm, while Bcl2 (anti-apoptotic) expression was higher in OO ≤ 3 mm. Comparing OO with CC from the same size of follicles, there was higher expression of Bcl2 in OO ≤ 3 mm, and lower expression of p53 in OO > 3mm. LEPR tended to be more expressed in CC > 3mm than ≤ 3 mm. Was observed a positive correlation between p53 and BAX expression in OO (r = 0.66), and between Bax in OOs and LEPR in CCs (r = 0.64). It was concluded that the expression of anti- and pro-apoptotic genes in COC can be related to the follicle and oocyte development, since follicles ≤ 3 mm presented lower expression of factors promoting apoptosis. Additionally, leptin can be a regulatory factor of oocyte development due presence of LEPR in CC. / Fatores reguladores da apoptose podem determinar a viabilidade de oócitos, entretanto há poucos estudos referentes à ação dos genes destes fatores no desenvolvimento do complexo cumulus-oócito (COC) de folículos antrais, nem sua relação com a Leptina (LEP) e seu receptor (LEPR) em ovinos. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão do mRNA da LEP, LEPR, e dos fatores que levam a regulação da apoptose (Bcl-2, Bax, p53 e caspase), em oócitos (OO) e células do cumulus (CC) de folículos antrais ovinos de diferentes tamanhos. Foram avaliados 20 pools de OO (20 unidades) e de CC (de 20 COC) obtidos de folículos > 3 mm e ≤ 3 mm. A expressão gênica foi avaliada pela extração do mRNA e posterior amplificação do cDNA em real time PCR. Bcl2, p53 e caspase 3 foram expressos em todas as categorias de células e tamanho folicular. A expressão da Bax foi observada apenas em oócitos. LEP e LEPR foram expressos apenas em CC. A maior expressão dos fatores promotores da apoptose foi em OO > 3mm, enquanto a Bcl2 (anti-apoptótica) foi mais expressa nos OO ≤ 3 mm. Comparando OO com CC das mesmas categorias de folículos, houve maior expressão de Bcl2 nos OO ≤ 3 mm, e menor de p53 nos OO > 3mm. LEPR foi mais expressa em CC > 3mm. Houve correlação positiva entre a expressão de p53 e BAX em oócitos (r = 0,66), e entre Bax em OO e LEPR em CC (r = 0,64). Conclui-se que a expressão dos genes anti- e pró-apoptóticos em COC pode estar relacionada com o desenvolvimento folicular e oocitário, sendo que os menores (≤ 3 mm) apresentam menor expressão dos fatores promotores da apoptose. Adicionalmente, a leptina pode ser um fator regulatório do desenvolvimento oocitário devido a presença de seus receptores nas CC.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede2/5047 |
| Date | 26 February 2014 |
| Creators | SILVA, Diogo Manoel Farias da |
| Contributors | WISCHRAL, Aurea, SOUZA, Daniela Maria Bastos de, SANTOS, Igor Luiz Vieira de Lima, BATISTA, André Mariano |
| Publisher | Universidade Federal Rural de Pernambuco, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal Tropical, UFRPE, Brasil, Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE, instname:Universidade Federal Rural de Pernambuco, instacron:UFRPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -6143187600765506511, 600, 600, 600, 600, -8922364187987396204, 453670264235017319, 3590462550136975366 |
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