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Detecção de genes de virulência de Staphylococcus aureus identificados por PCR em amostras de leite de vacas com mastite clínica ou subclínica / Detection of virulence genes of Staphylococcus aureus identified by PCR in milk samples of cows with clinical and subclinical mastitis

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Previous issue date: 2014-02-21 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Staphylococcus aureus can produce a wide variety of virulence factors secreted or
associated with bacterial wall, among them the exotoxins. The pathogenicity of S.
aureus to the bovine udder is not quite clarified, but the staphylococcal exotoxins
and their combinations may play a role in the pathogenic potential of the
microorganism. Considering that knowing the virulence factors of S. aureus
provides an important information of the establishment of effective control
strategies of intramammary infections we aimed to detect the DNA of S. aureus
isolates from milk of cows with clinical or subclinical mastitis and identify genes
encoding bacterial exotoxins and superantigens. For this purpose, in the present
study were used 55 isolates of S. aureus, obtained from milk samples from cows
with clinical or subclinical mastitis. The isolates were electronically identified using
the methodology described by Vitek 2® device manual. Genomic DNA extrac ted
using the High Pure PCR Template Preparation Kit. The laboratory analysis for
detection of species and genes encoding the exotoxins were performed at the
Laboratório de Especialidades Biológicas of Centro de Pesquisa em Alimentos of
Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás
(LEB/CPA/EVZ/UFG). The gene eta was detected in 85,5% of the isolates, the pvl
gene in 63,6% and the tst gene in 14,5%. The etb gene was not isolated. It was
verified that the Real Time PCR technique for detection of sodA gene proved to be
effective in identifying the species S. aureus, and may become an important tool in
the diagnosis of the bovine mastits causing microorganisms. The isolates of S.
aureus mastitis harbor genes exotoxins, such as pvl, tst and eta, which the last
one may play an important role in the pathogenesis of bovine mastitis since the
majority of the isolates showed to be positive for its presence. / Staphylococcus aureus é capaz de produzir uma grande variedade de fatores de
virulência associados à parede bacteriana ou secretados, entre eles as
exotoxinas. Sua patogenicidade para o úbere bovino não está completamente
elucidada, mas as exotoxinas estafilocócicas e suas combinações podem
desempenhar papel no potencial patogênico do microrganismo. Levando em
consideração que o conhecimento dos fatores de virulência de S. aureus fornece
informações importantes para o estabelecimento de estratégias efetivas de
controle de infecções intramamárias, objetivou-se detectar o DNA de S. aureus
isolados de leite provenientes de vacas com mastite clínica ou subclínica e
identificar genes codificadores de superantígenos bacterianos e exotoxinas. Para
tanto, no presente estudo foram utilizados 55 isolados de S. aureus, obtidos a
partir de amostras de leite provenientes de vacas com mastite clínica ou
subclínica. Os isolados foram identificados eletrônicamente a partir da
metodologia descrita pelo manual do equipamento Vitek 2
®
. O DNA genômico
extraído utilizando o High Pure PCR Template Preparation Kit. As análises
laboratoriais de detecção da espécie e dos genes codificadores das exotoxinas
foram realizadas no Laboratório de Especialidades Biológicas do Centro de
Pesquisa em Alimentos da Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade
Federal de Goiás (LEB/CPA/EVZ/UFG). Detectou-se o gene eta em 85,5% dos
isolados, o gene pvl em 63,6% e o gene tst em 14,5%. O gene etb não foi
isolados. Verificou-se que a técnica de PCR em tempo real para detecção do
gene sodA, mostrou-se eficaz na identificação da espécie S. aureus, podendo se
tornar uma ferramenta importante no diagnóstico dos microrganismos causadores
de mastites bovinas. Os isolados de S. aureus de mastite carream genes de
exotoxinas, como pvl, tst e eta, sendo que este último pode ter um papel
importante na patogênese de mastites bovinas, visto que a maioria dos isolados
se mostraram positivos para a sua presença.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/4116
Date21 February 2014
CreatorsFreitas, Fernanda Antunha de
ContributorsMesquita, Albenones José de, Nicolau, Edmar Soares, Oliveira, Antonio Nonato de, Mesquita, Albenones José de, Carneiro, Megmar Aparecida dos Santos, Romero, Rolando Alfredo Mazzoni
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Ciência Animal (EVZ), UFG, Brasil, Escola de Veterinária e Zootecnia - EVZ (RG)
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess
Relation4581960685150189167, 600, 600, 600, 600, -6217552114249094582, 6702961356132007056, -961409807440757778

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