A doença do edema afeta os leitões desmamados e é causada por cepas de Escherichia coli adaptadas ao hospedeiro e produtoras da toxina Stx2e. A doença do edema é caracterizada por edema de pálpebras, ataxia, pedalagem, dificuldade locomotora, e morte súbita. No presente estudo foram avaliadas 158 cepas de E. coli positivas para presença do gene codificador da toxina Stx2e isoladas de 62 animais provenientes de 13 granjas localizadas nos Estados do Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás e Minas Gerais. As cepas foram submetidas a determinação do perfil de resistência, caracterização dos genes de virulência, determinação do grupo filogenético, expressão da toxina em cultivos de célula Vero, caracterização genotípica através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e polimorfismo do comprimento de fragmentos amplificados com uma única enzima (SE-AFLP). Dentre as 158 cepas stx2e+ foram identificadas 83,5% (132/158) apresentando resistência a três classes de antimicrobianos ou mais. Altos níveis de resistência forma identificados contra tetraciclina, sulfonamidas e florfenicol. A frequência dos genes de virulência associados a doença do edema como a fímbria F18, por exemplo, foi baixa em relação a outros estudos. Todas as 158 cepas testadas apresentaram a expressão da toxina e efeito citotóxico em células Vero. A caracterização dos grupos filogenéticos permitiu a distribuição das cepas nos quatro grupos descritos a seguir: grupo A 27,2% (43/158), grupo B1 3,8% (6/158), grupo B2 39,2% (62/158) e grupo D 29,8% (47/158). As cepas foram caracterizadas através da PFGE e do SE-AFLP e ambas as técnicas apresentaram altos índices discriminatórios (0,98 e 0,99 respectivamente). A associação mais frequente nas duas técnicas genotípicas foi observada em relação ao animal e a granja de origem. Apesar de pertencerem a um patotipo definido (STEC) e de serem altamente especializadas em relação ao hospedeiro, o suíno, foi observada uma grande variabilidade genética e de perfis de resistência entre as cepas de E. coli estudadas. / Edema disease affects weaning piglets and is caused by a host adapted Escherichia coli and producer of Stx2e toxin. The edema disease is characterized by swollen eyelids, ataxia, recumbence, convulsions, paralysis, or sudden death. In the present study were evaluated 158 E. coli strains Stx2e toxin gene positive isolated from 62 animals, from 13 swine herds located at Rio Grande do Sul, Santa Catarina, Mato Grosso, Paraná, São Paulo, Goiás and Minas Gerais States. Strains were submitted to resistance profile determination, virulence genes detection, phylogenetic group characterization, toxin expression in Vero cell culture, genotypic characterization through pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and single enzyme amplified fragments length polymorphism (SEAFLP). Among the 158 strains stx2e+ were identified 83.5% (132/158) resistant to more than three or more classes of antimicrobials, High levels of resistance were found against tetracycline, sulfonamide and florfenicol. The frequency of virulence genes associated to edema disease as F18 fimbriae, for example, was low in relation to other studies. All 158 tested strains presented Stx2e toxin expression and cytotoxic effect in Vero cell culture. The characterization of phylogenetic groups permitted the distribution of strains in four groups described as follow: group A 27.2% (43/158), group B1 3.8% (6/158), group B2 39.2% (62/158) and group D 29.8% (47/158). The strains were characterized through PFGE and the SE-AFLP, and both techniques presented high discriminatory index (0.98 and 0.99 respectively). The association more frequently in both techniques was observed in relation to animal and herd origin. Despite to belong to one defined pathotype (STEC) and to be highly specialized in relation to host, the swine, it was observed a high variability of genetic and resistance profile among tested E. coli.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:teses.usp.br:tde-13062013-102027 |
| Date | 30 January 2013 |
| Creators | Vasco Tulio de Moura Gomes |
| Contributors | Andrea Micke Moreno, Thaís Sebastiana Porfida Ferreira, Terezinha Knöbl |
| Publisher | Universidade de São Paulo, Epidemiologia Experimental e Aplicada às Zoonoses, USP, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP, instname:Universidade de São Paulo, instacron:USP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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