CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Wound healing is a complex and dynamic process involving an integrated action of several cell types, extracellular matrix and soluble mediators such as cytokines, which serve to recover the integrity of damaged anatomical structure. Natural products are the basis for many biotechnological inputs, as they are biologically active compounds with great potential for therapeutics and can provide molecular basis for many drugs in the clinics. Combretum leprosum Mart. is a native species of Caatinga, important biome in the Brazilian semiarid region, being popularly used in Brazil for the treatment of many diseases such as skin diseases. This study aimed to investigate the pro-healing potential of the ethanol extract (EECL) and the bioactive triterpene 3β, 6 β, 16 β-trihydroxylup-20 (29) ene (CLF-1) isolated from leaves of C. leprosum. Cell migration assay was performed using fibroblasts, which were treated with CLF-1 (1.75 Âg / ml and 2.5 Âg / ml) and analyzed after 0, 6 and 24 hours. Skin wounds (1 cm2) were induced in the dorsal region of mice (n = 30) and were treated with daily topical application (100Âl) according to the group: saline, EECL (100μg / ml) and CLF-1 (100μg / ml) for 12 days. The results showed that CLF-1 did not show toxicity to fibroblasts and further increased cell proliferation and migration so that a significant increase on injury closing percentage was observed using both concentrations (1.75 mg / ml vs 2.5 mg / mL,) compared to control (p <0.05). Within 24 hours, there was also a significant increase in the rate of migration comparing CLF-1 at 2.5 ug / ml and control group (p<0.05). For the in vivo analysis, on the 2nd post surgical day (PS), the lesions treated with EECL and CLF-1 showed moderate presence of vessels in granulation tissue progressing to the dermis, as well as a slight inflammatory infiltrate. It was also observed that, on the 7th PS day, the animals treated with CLF-1 showed moderate angiogenesis, whereas animals treated with saline showed cell proliferation and migration into the wound. Furthermore, on the 12th day PS, the animals treated with EECL and CLF-1 showed complete closing of the injury, while those receiving saline exhibited open wounds. Thus, it was concluded that EECL and CLF-1 showed pro-healing effects, as well as a possible anti-inflammatory action and additional research is needed to elucidate its mechanisms in the wound healing process. / A cicatrizaÃÃo cutÃnea à um processo complexo e dinÃmico que envolve uma aÃÃo integrada de vÃrios tipos celulares, matriz extracelular e mediadores solÃveis como citocinas, que tem por finalidade a recuperaÃÃo da integridade da estrutura anatÃmica danificada. Produtos naturais sÃo a base para diversos insumos biotecnolÃgicos, pois sÃo compostos biologicamente ativos com grande potencial terapÃutico, e que podem formar bases moleculares para muitas drogas em uso clÃnico. Combretum leprosum Mart. à uma espÃcie nativa da Caatinga, bioma importante na regiÃo do semiÃrido brasileiro, sendo esta espÃcie popularmente utilizada no Brasil para o tratamento de diversas doenÃas, tais como doenÃas de pele. O presente estudo investigou o potencial prÃ-cicatrizante do extrato etanÃlico (EECL) e do triterpeno bioativo 3β, 6 β, 16 β-trihydroxylup-20 (29)-eno (CLF-1) isolado das folhas de C. leprosum. Para isto, o ensaio de migraÃÃo de cÃlulas foi realizado com fibroblastos, que foram pÃs tratados com CLF-1 (1,75 μg/mL e 2,5 μg/mL) e analisados em 0, 6 e 24 horas. Feridas cutÃneas (1 cm2) foram realizadas na zona dorsal de camundongos (n=30) e em seguida foram tratadas com uma aplicaÃÃo tÃpica diÃria (100 μl) de acordo com o grupo: salina, EECL (100μg/mL) e CLF-1 (100μg/mL) durante 12 dias. Os resultados demonstraram que CLF-1 nÃo apresentou toxicidade aos fibroblastos e, ainda, em 6 horas estimulou a proliferaÃÃo e migraÃÃo celular, de modo que observou-se um aumento significativo na porcentagem de fechamento em ambas concentraÃÃes (1,75 μg/mL e 2,5 μg/mL) em relaÃÃo ao controle (p<0,05). Em 24 horas, verificou-se tambÃm aumento significativo na taxa fechamento quando comparado CLF-1 2,5 μg/mL em relaÃÃo ao controle (p<0,05). Na avaliaÃÃo in vivo, observou-se no 2 dia pÃs cirÃrgico (P.C.), que as lesÃes tratadas com EECL e CLF-1 mostraram presenÃa moderada de vasos no tecido de granulaÃÃo, progredindo na derme, bem como apresentaram um leve infiltrado inflamatÃrio. Observou-se, ainda, que no 7 dia P.C. os animais tratados com CLF-1 demonstraram moderada angiogÃnese, enquanto que os animais tratados com salina apresentaram proliferaÃÃo e migraÃÃo celular em direÃÃo ao leito da ferida. Ademais, no 12 dia P.C., os animais tratados com EECL e CLF-1 apresentaram o fechamento completo da lesÃo, enquanto os que receberam salina, apresentaram, ainda, feridas abertas. Desta forma, foi possÃvel concluir que o EECL e o CLF-1 apresentaram efeitos prÃ-cicatrizante, bem como uma possÃvel aÃÃo anti-inflamatÃria e investigaÃÃes adicionais sÃo necessÃrias para elucidar o mecanismo de aÃÃo no processo de cicatrizaÃÃo cutÃnea.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:10066 |
| Date | 28 August 2015 |
| Creators | LÃvia Coelho de Assis |
| Contributors | Edson Holanda Teixeira, Max Victor Carioca Freitas, Maria Jania Teixeira, Helcio Silva dos Santos |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Patologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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