Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / Les liposomes ayant des lipides cationiques (liposomes cationiques) sont
évalués dans plusieurs domaines thérapeutiques pour la libération
intracellulaire des oligonucléotides antisenses et des plasmides ayant
différents gènes humains. La majorité de ces liposomes sont composés
de dioléoylphosphatidyléthanolamine (DOPE) pour assurer la
déstabilisation de l'endosome suite à l'endocytose, et d'un lipide
cationique pour assurer l'interaction avec les molécules d'ADN
négativement chargés. Bien que les liposomes cationiques ont été
administrés via les voies orale, pulmonaire et systémique, leur problème
de stabilité dans différents milieux biologiques n'était pas complètement
résolu. Il était déjà démontré que les liposomes cationiques ayant des
ADN plamidiques sont déstabilisés par les protéines anioniques se
trouvant dans le plasma.
Les liposomes ayant une couche de poly(éthylène glycol) (PEG) à la
surface ont largement contribué au développement des liposomes à
longue circulation à cause de l'interaction réduite avec les protéines
plasmatiques et les membranes cellulaires.
Les liposome-PEG sont normalement préparés en faisant dissoudre le
lipide-PEG avec les autres lipides et les phospholipides dans la phase
organique avant l'hydratation et l'association des lipides en liposomes.
Cette méthode conventionnelle d'incorporation de PEG possède plusieurs inconvénients. D'une part, les chaînes polymériques sont incorporées
dans l'espace interne aqueux et entre les bicouches lipidiques où l'eau est
normalement enfermée. Ceci réduit significativement le volume aqueux
interne et nuit à l'incorporation des médicaments dans les liposomes.
D'autre part, les molécules d'ADN sont reconnues pour se lier aux lipides
cationiques dans les liposomes par des forces électrostatiques en formant
des complexes ADN/liposome assez stables.
Dans cette étude, nous présentons deux méthodes de modification des
liposomes pré-formés, l'une est une réaction chimique ayant lieu dans le
milieu aqueux et l'autre est une insertion des dérivés pégylés connus pour
être non-toxiques et économiques. Ces nouvelles procédures de postmodification liposonnique s'effectuent dans des conditions douces et dans
des temps très courts.
L'efficacité de ces nouvelles méthodes a été prouvée par les mesures du
changement de diamètre et de la charge apparente à la surface des
liposomes. Les liposomes classiques DOPE/DOTAP (1:1) ont un potentiel
zéta (Ç) moyen de +33 mV et l'incorporation par la méthode
conventionnelle de 1 et 0.5 mol% de PE-PEG2000
(Phosphatidyléthanolamine-PEG2000) et PE-PEG5000réduit complètement la
charge des liposomes. Une concentration cinquante fois plus grande de
M-SC-PEG (N-hydroxysuccinimidyl carbonate méthoxy-PEG) et BTC-PEG
(Benzotriazolyl carbonate PEG) était nécessaire pour réduire la charge
des liposomes pré-formés d'une façon significative. La méthode d'insertion membranaire du PEG1760-nnonostéarate s'avère
beaucoup plus avantageuse vu le temps très minime qu'elle requiert (1
minute) d'une part, et l'efficacité d'insertion proche de 95% d'autre part,
une efficacité jamais préalablement atteinte.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:umontreal.ca/oai:papyrus.bib.umontreal.ca:1866/32986 |
| Date | 11 1900 |
| Creators | Saoud, Mireille |
| Contributors | Phillips, Nigel |
| Source Sets | Université de Montréal |
| Language | fra |
| Detected Language | French |
| Type | thesis, thèse |
| Format | application/pdf |
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