Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo / La presente investigación se realizó con el objetivo de mejorar y adaptar el protocolo de
micropropagación normalmente utilizado para arándano, Woody Plant Medium (Lloyd y
McCown, 1980) (Anexo 1), utilizado en el Laboratorio de Genética Vegetal de la
Universidad de Chile para las variedades highbush: Bluecrop, Duke y Misty.
Se realizaron ensayos con el fin de cubrir todo el proceso de micropropagación, desde la
etapa de establecimiento hasta la aclimatación. En la etapa de establecimiento se realizó un
ensayo de luz y oscuridad, con el fin de disminuir los explantes necrosados, causados por la
presencia de compuestos fenólicos al someter los explantes a altas intensidades lumínicas.
Se determinó estadísticamente que no existían diferencias significativas entre los
tratamientos, para los parámetros número, crecimiento, tasas de establecimiento y tasa de
proliferación de brotes, en las tres variedades, sin embargo se observó una tendencia
positiva en respuesta a la oscuridad en las variedades Misty y Duke en los parámetros
evaluados, mientras que la variedad Bluecrop se comportó en forma indiferente a la
oscuridad.
En la etapa de multiplicación se realizó un ensayo donde se probaron 4 niveles de pH en los
medios de cultivo (pH: 5,0 – 5,3 – 5,7 – 6,0) con el objetivo de determinar el nivel al cual
se produjo mayor crecimiento de brotes. Estadísticamente no se encontraron diferencias
significativas entre los tratamientos para los parámetros evaluados y variedades, sin
embargo también se presentó una tendencia positiva al crecimiento de brotes y tasa de
proliferación a pH 5,0-5,3. A pH más altos se mantuvo el crecimiento de los brotes, pero
este fue menor, y en algunos casos se produjo necrosamiento de explantes, comportamiento
que se repitió en las tres variedades.
Se realizó un ensayo de pre-aclimatación in vitro solo en la variedad Bluecrop para
determinar el efecto de enraizamiento y aclimatación de los brotes. Los tratamientos de preaclimatación
in vitro consistieron en someter los brotes durante 30 o 60 días en un medio de
cultivo sin regulador de crecimiento, y una repetición de cada uno de ellos agregando 20 cc
de agua destilada estéril sobre el medio sólido, 10 días antes de completar los 30 o 60 días.
Se encontraron diferencias significativas en el número de brotes enraizados, a los 10 días de
evaluación, presentando mayor número de brotes enraizados en aquellos sometidos a 30
días en un medio sin regulador de crecimiento. Por otra parte los brotes sometidos durante
60 días en este medio sin regulador de crecimiento y su repetición con agua, presentaron
mayor longitud, vigor, tamaño y número de hojas. La adición de agua destilada no tuvo un
efecto mayor en la aclimatación de los brotes. / This research was conducted to improve and adapt the protocol normally used for
micropropagation of blueberry Woody Plant Medium (Lloyd and McCown, 1980) (Annex
1) used in the Laboratory of Plant Genetics, University of Chile, for varieties highbush,
Bluecrop, Duke and Misty.
Trials were conducted in order to cover all the micropropagation process, from setting up
the stage of acclimation. At the stage of establishing a trial of light and darkness, in order to
reduce the explants necrotic, caused by the presence of phenolic compounds, subjecting
explants to high light intensity. It was determined that there were no statistically significant
differences among the treatments for the parameters number, growth rates of establishment
and rate of proliferation of shoots in the three varieties, however a positive trend was
observed in response to the dark varieties Misty Duke and evaluated on the parameters,
while the variety Bluecrop behaved in any way in the dark.
During the multiplication was performed a test where 4 different pH levels were tested: 5,0-
5,3- 5,7- 6,0 in the culture media to determine the level at which there was greater growth
of shoots. No statistically significant differences were found between treatments for the
evaluated parameters and varieties; however it was observed a positive trend in the growth
rate of shoots and proliferation at pH 5.0-5.3. Higher pH maintained shoot growth, but this
was minor, and in some cases there were necrotic explants, this behaviour were observed in
the three varieties.
It was performed a trial of pre-acclimated in vitro only in the variety Bluecrop to determine
their effect on rooting and acclimatization of shoots. The pre-treatment consisted of in vitro
acclimatization submit outbreaks for 30 or 60 days in culture medium without growth
regulators, and a repeat each adding 20 cc of sterile distilled water on the solid medium, 10
days before completing the 30 and 60 days. We found significant differences in the number
of rooted shoots, the 10 days of evaluation, a greater number of shoots rooted in those
subjected to 30 days in a medium without growth regulators. On the other hand shoots
subjected during 60 days in this medium without growth regulator and re-using water,
showed a greater length, force, size and number of leaves. The addition of distilled water
did not have a greater effect on acclimation of shoots.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/112441 |
| Date | January 2009 |
| Creators | Toro Cano, Marisol Alejandra |
| Contributors | Prat Del Río, María Loreto, Facultad de Ciencias Agronómicas, Escuela de Agronomía |
| Publisher | Universidad de Chile |
| Source Sets | Universidad de Chile |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | Tesis |
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