Protein p53 je jednou z nejdůležitějších molekul v lidském těle. P53 reguluje celou řadu procesů v buňce, jako je například oprava DNA, buněčný cyklus nebo indukce apoptózy. Protein p53 je známý i jako „strážce genomu“. DNA vazebné schopnosti proteinu p53 jsou důležité pro normální vývoj a růst buňky. Mutace genu pro p53 mohou vést ke ztrátě jeho DNA vazebných vlastností a funkce nádorového supresoru, což muže způsobit rozvoj rakoviny. Teoretická část této diplomové práce je zaměřena na popis vlastností, funkce a mechanismus aktivace proteinu p53 a popis lokálních sekundárních struktur DNA. Hlavním cílem experimentální části byla produkce čtyř mutantních forem proteinů p53 a wild-type p53 proteinu a studium jejich vazebných vlastnosti s různými lokálními sekundárními strukturami DNA. Pomoci Gateway klonovacího systému byly připraveny čtyři expresní vektory, které byly použity pro produkci proteinů v bakteriálním expresním systému. Celkem byly úspěšně připraveny čtyři mutantní formy a wild-type p53 protein. Jejich vazebné vlastnosti byly studovány gelovou retardační analýzu. Výsledky naznačují různé DNA-vazebné vlastnosti wild-type p53 a studovaných mutantních forem tohoto proteinu. Všechny mutantní proteiny ztratily schopnost sekvenčně specificky vázat DNA, zatímco nespecifická interakce s DNA byla pozorována u tří ze čtyř mutantních forem. Jeden ze studovaných mutantních proteinů se vázal jenom na superhelikální formu DNA.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:nusl.cz/oai:invenio.nusl.cz:413550 |
| Date | January 2020 |
| Creators | Osadchuk, Olha |
| Contributors | Zemanová, Jana, Brázda, Václav |
| Publisher | Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická |
| Source Sets | Czech ETDs |
| Language | English |
| Detected Language | Unknown |
| Type | info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Rights | info:eu-repo/semantics/restrictedAccess |
Page generated in 0.002 seconds