Return to search

Optimalizace izolace mutantního proteinu p53 a jeho DNA vazebné vlastnosti / Optimization of p53 mutant protein isolation and its DNA binding properties

Protein p53 je jednou z nejdůležitějších molekul v lidském těle. P53 reguluje celou řadu procesů v buňce, jako je například oprava DNA, buněčný cyklus nebo indukce apoptózy. Protein p53 je známý i jako „strážce genomu“. DNA vazebné schopnosti proteinu p53 jsou důležité pro normální vývoj a růst buňky. Mutace genu pro p53 mohou vést ke ztrátě jeho DNA vazebných vlastností a funkce nádorového supresoru, což muže způsobit rozvoj rakoviny. Teoretická část této diplomové práce je zaměřena na popis vlastností, funkce a mechanismus aktivace proteinu p53 a popis lokálních sekundárních struktur DNA. Hlavním cílem experimentální části byla produkce čtyř mutantních forem proteinů p53 a wild-type p53 proteinu a studium jejich vazebných vlastnosti s různými lokálními sekundárními strukturami DNA. Pomoci Gateway klonovacího systému byly připraveny čtyři expresní vektory, které byly použity pro produkci proteinů v bakteriálním expresním systému. Celkem byly úspěšně připraveny čtyři mutantní formy a wild-type p53 protein. Jejich vazebné vlastnosti byly studovány gelovou retardační analýzu. Výsledky naznačují různé DNA-vazebné vlastnosti wild-type p53 a studovaných mutantních forem tohoto proteinu. Všechny mutantní proteiny ztratily schopnost sekvenčně specificky vázat DNA, zatímco nespecifická interakce s DNA byla pozorována u tří ze čtyř mutantních forem. Jeden ze studovaných mutantních proteinů se vázal jenom na superhelikální formu DNA.

Identiferoai:union.ndltd.org:nusl.cz/oai:invenio.nusl.cz:413550
Date January 2020
CreatorsOsadchuk, Olha
ContributorsZemanová, Jana, Brázda, Václav
PublisherVysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Source SetsCzech ETDs
LanguageEnglish
Detected LanguageUnknown
Typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis
Rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess

Page generated in 0.002 seconds