CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Com o objetivo de verificar a interferÃncia da broncoprovocaÃÃo antigÃnica sobre a contratilidade traqueal, ratos machos (250 -350 g) foram sensibilizados à ovalbumina (OVA) e, 13 a 14 dias depois, desafiados em intervalos de 15 minutos atravÃs da inalaÃÃo do antÃgeno sensibilizante (OVA, 1 mg/ml, seguida de 5 mg/ml). O sacrifÃcio dos animais foi feito imediatamente (SD0) ou 24 horas (SD24) apÃs o desafio antigÃnico atravÃs de anestesia com hidrato de cloral (0,4 g/Kg). Alguns animais foram tratados com metilsergida (1 mg/Kg) 40 minutos antes do desafio. Os animais controle (CONT) inalaram apenas o veÃculo (NaCl 0,9 %). A traquÃia foi removida e montada em cuba para orgÃo isolado contendo 10 ml de soluÃÃo de Krebs-Henseleit modificada (mantida a 37Â0,5 oC) e aerada com mistura carbogÃnica (O2/CO2â95:5). Foram confeccionadas curvas concentraÃÃo-efeito (CCE) para cloreto de potÃssio (KCl), acetilcolina (ACh) ou serotonina (5-HT). Em outros experimentos foram realizadas CCE ao Ca2+ em preparaÃÃes mantidas previamente em soluÃÃo sem Ca2+ (contendo 10-5 M de EDTA, nifedipina e indometacina, 10-6 M para ambas) e estimuladas por KCl, ACh ou 5-HT. A sensibilizaÃÃo e o posterior desafio antigÃnico (SD) promoveram um significativo aumento da resposta mÃxima (RM) das CCE ao KCl (forÃa em grama, mÃdia  E.P.M.: CONT = 0,52  0,01; SD24 = 1,22  0,03; n = 06; p < 0,01), à ACh (CONT = 2,11  0,10; SD24 = 3,53  0,03; n = 06; p < 0,01) ou à 5-HT (CONT = 0,60  0,03; SD24 = 1,48  0,09; n = 06; p < 0,01). As traquÃias de animais sensibilizados e desafiados apresentaram aumento da RM ao Ca2+ apenas quando prÃ-contraÃdas com KCl (CONT = 0,84  0,08; SD24 = 1,98  0,05; n = 6; p < 0,01) ou ACh (CONT = 0,98  0,09; SD24 = 1,54  0,15; n = 6; p < 0,05). Quando o agonista utilizado foi a 5-HT esta diferenÃa nÃo ocorreu, sendo observada uma maior RM somente na ausÃncia de nifedipina (CONT = 0,81  0,06; SD24 sem nifedipina = 1,23  0,08; n = 05; p < 0,01). Foram comparados os animais apenas sensibilizados e nÃo desafiados (SENS) com os SD na presenÃa de Ãcido niflÃmico (AN). O AN inibiu a hiperreatividade para a 5-HT induzida pelo desafio antigÃnico (SENS = 1,28  0,09; SD24 + AN = 1,01  0,08; n = 05), enquanto que foi ineficaz em inibir a hiperreatividade para a ACh (SENS = 1,44  0,01; SD24 + NA = 1,67  0,03; n = 05; p < 0,01). Portanto, os resultados mostram que hà envolvimento de canais de Ca2+, tanto dependentes de voltagem (VOC) como operados por receptor (ROC), na hiperreatividade do mÃsculo liso respiratÃrio, induzida pela reapresentaÃÃo do antÃgeno a animais previamente sensibilizados e que o desenvolvimento da hiperreatividade para a 5-HT està relacionado à abertura de canais de Cl- ativados por Ca2+ / In order to verify the interference of the antigenic challenge on traqueal contractility in vitro, male rats (250 -350 g) were ovalbumine (OVA)-sensitized and, 13 to 14 days later, they were challenged through the sensitizing antigen inhalation (OVA, 1 mg/ml, followed by 5 mg/ml). Animals were sacrificed immediately (SD0) or 24 hours (SD24) after the antigenic challenge through chloral hydrate anaesthesia (0,4 g/Kg). Some animals were treated with metilsergide (1 mg/Kg) 40 minutes before the challenge. Control animals (CONT) received only the vehicle (NaCl 0,9 %) by inhalation. Tracheal rings were carefully removed and mounted in a 10 ml isolated bath chamber with modified Krebs-Henseleit solution (at 37Â0,5 oC) bubbled with a mixture of 5% of CO2 in 95% of O2. Concentration-effect curves (CCE) were constructed for potassium chloride (KCl), acetycholine (ACh) or serotonin (5-HT). In another experiments, CCE for Ca2+ addition were constructed under Ca2+-free conditions (with 10-5 M EDTA, nifedipine and indomethacin, 10-6 M each) in the presence of KCl, ACh or 5-HT. Sensitization and subsequent antigenic challenge (SD) promoted a significant increase of the maximal response (RM) of the CCE to KCl (force in grams, mean  S.E.M.: CONT = 0,52  0,01; SD24 = 1,22  0,03; n = 06; p < 0.01), ACh (CONT = 2.11  0,10; SD24 = 3,53  0,03; n = 06; p < 0.01) or to 5-HT (CONT = 0,60  0,03; SD24 = 1,48  0,09; n = 06; p < 0.01). Tracheal rings of sensitized and challenged animals showed a rise in RM for Ca2+ only when they were pre-contracted with KCl (CONT = 0,84  0,08; SD24 = 1,98  0,05; n = 6; p < 0.01) or ACh (CONT = 0,98  0,09; SD24 = 1,54  0,15; n = 6; p < 0,05). When 5-HT was used as agonist this hyperresponsiveness did not occur, being observed only in the nifedipine absence (CONT = 0.81  0,06; SD24 without nifedipine = 1,23  0,08; n = 05; p < 0.01). The sensitized but not challenged animals (SENS) were compared to SD animals in the presence of niflumic acid (AN). AN inhibited the antigenic shock-induced hyperresponsiveness for 5-HT (SENS = 1,28  0,09; SD24 + AN = 1.01  0,08; n = 05), while it was ineffective in inhibit that for the ACh (SENS = 1,44  0,01; SD24 + AN = 1,67  0,03; n = 05; p < 0.01). Therefore, the results show that there is a participation of Ca2+ channels, both voltage- and receptor-operated channels, in the hyperresponsiveness of the respiratory smooth muscle, induced by the representation of the antigen to previously sensitized animals and, in addition, the Cl- channels Ca2+-activated have an important role on 5-HT hyperresponsiveness development
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:364 |
Date | 15 October 2004 |
Creators | Carlos Tiago Martins Moura |
Contributors | Francisco Ruy Capaz, ArmÃnio Aguiar dos Santos, FlÃvia Almeida Santos, Pedro Jorge Caldas MagalhÃes |
Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Portuguese |
Detected Language | English |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Format | application/pdf |
Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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