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Implementación de metodología para la identificación y cuantificación de Streptococcus mutans mediante PCR en tiempo real en muestras de saliva y placa dental

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Son más de 700 especies bacterianas identificables en la cavidad oral
humana. Entre ellas, Streptococcus mutans se cree que desempeña un papel
importante como un factor microbiológico para la iniciación de la caries dental.
El manejo clínico de la caries dental se ha dirigido principalmente al
tratamiento de las consecuencias del proceso de la enfermedad mediante
restauraciones y no en su prevención. Con el uso de tecnología emergente, se
podrá evaluar el riesgo de la enfermedad de caries en una fase anterior a la de la
lesión incipiente de mancha blanca clínicamente visible.
Recientemente se ha demostrado que PCR en tiempo real es un método
sensible y rápido para la identificación y cuantificación de las especies
microbianas individuales.
Para este estudio se seleccionaron 27 niños al azar, de 8 años de edad,
provenientes del área norte de la RM. Se recolectó 3ml. de saliva no estimulada,
en las primeras horas de la mañana sin cepillado previo, solicitando su depósito
en un tubo de plástico estéril, el cual se mantuvo a 4ºC hasta su traslado al
laboratorio. La placa supragingival se recogió de todas las superficies dentarias
lisas de dientes anteriores y posteriores con curetas periodontales estériles. Las
muestras de saliva y placa bacteriana previamente rotuladas, se almacenaron a
-80°C para su posterior procesamiento.
Los partidores utilizados para cuantificar mediante qPCR el gen gtfB de S.
mutans fueron Smut 3368-F y Smut 3481-R.
Los resultados obtenidos de la amplificación mediante qPCR tuvo un
porcentaje de eficiencia del 98% y el delta entre cada ciclo fue de 3,36.
En la curva de melting se obtuvo un solo pick de amplificación a una misma
temperatura para todas las muestras.
La metodología presentada permite la identificación y cuantificación
específica para el gen gtfB de S. mutans en muestras de saliva y biopelícula
dental, de manera rápida y exacta. Lo que permite establecer el riesgo cariogénico
individual de cada paciente y con ello realizar medidas preventivas, evitando así la
aparición de lesiones y su posible transmisión.

Identiferoai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/131302
Date January 2013
CreatorsDuperat Sánchez, Lorena del Carmen
ContributorsPalma Fluxá, Patricia Liliana, Facultad de Odontología, Departamento de Patología y Medicina Oral, Corsini acuña, Gino,, Yévenes López, Ismael
PublisherUniversidad de Chile
Source SetsUniversidad de Chile
LanguageSpanish
Detected LanguageSpanish
TypeTesis

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