Σε αυτή τη μελέτη εξατάσαμε κατά πόσον οι φλεγμονώδεις κυτοκίνες ρυθμίζουν την έκφραση της δισακχαριδάσης της ψηκτροειδούς παρυφής των εντεροκυττάρων, σουκράσης-ισομαλτάσης(ΣΙ), στην κυτταρική σειρά Caco2. Επίσης εξετάσαμε την πιθανότητα οι κυτοκίνες να ρυθμίζουν την έκφραση και άλλων ειδικών πρωτεϊνών των εντεροκυττάρων, χρησιμοποιώντας την λακτάση σαν πρότυπο. Τέλος εξετάσαμε την πιθανότητα καταστολής του γονιδίου της ΣΙ στα εντεροκύτταρα των λαχνών in vivo, κατά την τοπική φλεγμονώδη αντίδραση της νόσου του Crohn. Για τις μελέτες μας χρησιμοποιήσαμε τεχνικές κυτταροκαλλέργειας, βιοσυνθετικής σήμανσης-ανοσοκαθίζησης-ηλεκτροφόρησης, ανάλυση προστασίας ριβονουκλεάσης, ανοσοϊστοχημεία και ανάλυση υβριδισμού in situ. Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η IL-6 και η IFN-γ προκαλούν ελάττωση, και ο TNFα αύξηση της ΣΙ στα Caco2 κύτταρα. Η σύνθεση τηε λακτάσης δεν επηρεάζεται. Υπάρχει μια εκσεσημασμένη και ειδική ελάττωση της γονιδιακής έκφρασης της ΣΙ στα εντεροκύτταρα των λαχνών ειλεού νόσου του Crohn με οξεία φλεγμονή, σε σύγκριση με παρακείμενο μη φλεγμαίνοντα ειλεό και με φυσιολογικό ειλεό. Τα αποτελέσματα παρέχουν απόδειξη για ένα μέχρι τώρα άγνωστο μηχανισμό ανεπάρκειας δισακχαριδάσης στην εντερική φλεγμονή. / In the present study we examined whether inflammatory cytokines regulate the expression of the enterocyte brush border disaccharidase sucrase-isomaltase(SI), in the Caco2 cell line. We also examined the possibility that inflammatory cytokines regulate the expression of other enterocyte-specific proteins, using lactase as a prototype. Last we examined the possibility that SI gene expression is down-regulated in villous enterocytes in vivo during the local inflammatory response of Crohn´s disease. For our studies we used techniques including cell culture, biosynthetic labeling-immunoprecipitation-electrophoresis, ribonuclease protection assay, immunocytochemistry and in situ hybridization anlysis. The results show that IL-6 and IFN-γ mediate a decrease, whereas TNFα mediates an incrase in SI synthesis in Caco2 cells. Synthesis of lactase is not affected. There is a marked and specific decrease in SI gene expression in villous enterocytes in acutely inflammed Crohn´s ileum, as compared to adjacent uninflammed ileum and normal ileum. The results provide evidence for a previously unrecognized mechanism for disaccharidase deficiency in intestinal inflammation.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:upatras.gr/oai:nemertes:10889/379 |
| Date | 27 June 2007 |
| Creators | Ζιαμπάρας, Θεόδωρος |
| Contributors | Μπεράτης, Νικόλαος, Φρίμας, Κωνσταντίνος, Νικολοπούλου, Βασιλική, Ziambaras, Theodoros, Παπαναστασίου, Δημήτριος, Θωμόπουλος, Κωνσταντίνος, Ανθρακόπουλος, Μιχαήλ, Μανταγός, Στέφανος, Γώγος, Χαράλαμπος, Λαμπροπούλου-Καρατζά, Χρυσούλα, Μπεράτης, Νικόλαος |
| Source Sets | University of Patras |
| Language | gr |
| Detected Language | Greek |
| Relation | Η ΒΥΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. |
Page generated in 0.0012 seconds