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Dissertação Tiago Oliveira Ribeiro_PMBqBM-UFBA.pdf: 3905396 bytes, checksum: 787178064bf80c2b44514b51172abf04 (MD5) / FAPESB / O diabetes mellitus têm se configurado como uma grave doença que acomete
aproximadamente 415 milhões de pessoas no mundo. O transplante de ilhotas
pancreáticas surge como uma alternativa terapêutica para esta doença. No entanto, a
viabilidade reduzida das ilhotas após o isolamento, e a perda dos capilares
sanguíneos que irrigam as ilhotas acarreta uma diminuição na sobrevivência das
células e a rejeição imunológica ao enxerto. As células tronco mesenquimais (CTMs)
surgem como uma opção interessante devido a sua capacidade de promover a
vascularização por meio da liberação de fatores de crescimento e citocinas próangiogênicas.
O objetivo desde estudo foi monitorar in vitro o potencial angiogênico
do meio condicionado (MC) de CTMs provenientes de medula óssea sobre células
endoteliais visando aperfeiçoar a revascularização e a viabilidade de ilhotas
pancreáticas humanas. As CTMs de medula óssea foram caracterizadas pela
expressão de marcadores moleculares, potencial de multi-linhagem e dobramento
populacional. O MC de CTMs promoveu a migração, proliferação, viabilidade e
angiogênese de células endoteliais da veia umbilical humana (HUVECs). O MC ativou
a via de sinalização PI3K/Akt em HUVECs. PCR quantitativo em tempo real e array
do perfil proteômico do MC demostraram que as células tronco expressam e secretam
diversos fatores tróficos e citocinas sob condições de hipóxia. Ensaios in vitro
demonstraram que o MC promoveu um aumento na viabilidade das ilhotas, assim
como na manutenção da expressão de insulina e de CD31 nas células endoteliais
intra-ilhotas. Com estes dados nós concluímos que o MC das CTMs em hipóxia
demonstrou potencial angiogênico e contribuíram para a manutenção da viabilidade
das ilhotas pancreáticas através da presença de fatores protéicos solúveis. Ainda,
estes efeitos foram mediados através da via de AkT nas células endoteliais. Nossos
dados corroboram o uso de MC de CTM para otimizar o transplante de ilhotas
pancreáticas. / Diabetes mellitus has been characterized as a serious disease that affects
approximately 415 million people worldwide. The islet transplantation emerged as an
alternative treatment for diabetes. However, the reduced islet cell viability after the
isolation and the loss of islet vasculature cause a decrease in the survival of the cells
and the immunological graft rejection. Mesenchymal stem cells (MSCs) appear as an
interesting option to reduce barriers for this therapy due to its ability to promote
vascularization through the release of growth factors and pro-angiogenic cytokines.
The goal of this study was investigate in vitro the angiogenic potential of contidioned
medium derived from bone marrow on endothelial cells aiming to improve
revascularization and viability of human pancreatic islets. MSCs from bone marrow
was characterized by the expression of molecular markers, multi-lineage potential and
population doubling. MSC derived conditioned medium showed ability to promote
migration, proliferation, viability and angiogenesis of human umbilical vein endothelial
cells (HUVEC). Conditioned Medium activated the PI3K/Akt signaling pathway in
HUVECs. q-PCR and proteome profiler array of conditioned medium fractions showed
that the stem cells expressed and secrete several trophic factors and cytokines under
hypoxic conditions. Insights in vitro proposed that conditioned medium promoted an
increase in islet viability as well as increased in insulin secretion and maintenance of
intra-islet endothelial cells. With this information we conclude that CM from MSCs in
hypoxia showed angiogenic potential and contributed to maintaining the viability of
pancreatic islets by the presence of soluble protein factors. Furthermore, these effects
were mediated by Akt pathway in endothelial cells. Our data support the use of CM
from CTM to optimize islet transplantation.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/23470 |
| Date | 02 September 2016 |
| Creators | Ribeiro, Tiago Oliveira |
| Contributors | Fortuna, Vitor Antonio, Labriola, Letícia, Rossi, Maria Isabel Doria, Rocha, Clarissa Araújo Gurgel |
| Publisher | Instituto de Ciências da Saúde, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Bioquímica e Biologia Molecular, PMBqBM, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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