El primer brote de legionelosis ocurrido en España, diagnosticado retrospectivamente, se produjo en 1973 entre un grupo de escoceses alojados en un hotel de Benidorm. Desde entonces, se han originado numerosos casos y brotes de esta enfermedad en nuestro país. Entre ellos destaca el brote acontecido en Murcia a principios de julio del año 2001. Éste ha sido el brote más importante en cuanto a magnitud producido a nivel mundial, en él se confirmaron más de 400 casos de legionelosis. A pesar de considerarse como una enfermedad infecciosa potencialmente erradicable aplicando las medidas higiénico-sanitarias establecidas por la legislación vigente, la legionelosis en España cuenta con una incidencia situada por encima de la media europea. En los últimos años se está detectando un incremento de casos esporádicos comunitarios. En éstos, existe poca información acerca de las posibles fuentes de infección y se desconoce la importancia que pueda tener la red de distribución de agua de consumo humano como reservorio de estos microorganismos. Asimismo el estudio de Legionella no está contemplado en los criterios sanitarios de la calidad del agua de consumo humano establecidos por la legislación.
Este trabajo pretende determinar la contaminación por Legionella tanto en torres de refrigeración, mantenidas correctamente según indica la legislación vigente (RD 865/2003) como en el agua de consumo humano, localizadas ambas en distintos puntos de la geografía española.
Se muestrearon mensualmente durante tres años (2006-2008) 157 puntos de agua de consumo humano, ubicados en la acometida de edificios públicos y 309 torres de refrigeración. El análisis para la detección y recuento de Legionella se realizó mediante la técnica de cultivo según la Norma Internacional ISO 11731:1998. En este trabajo se detectó Legionella en el agua de consumo humano únicamente de la zona sur y este de España y se encontró la bacteria en el 20.3% de los puntos de muestreo de la red de distribución de agua potable y en el 37.2% de la torres de refrigeración situadas en diferentes áreas geográficas. De éstas, en el 56.5% se aisló Legionella en más de una ocasión. Los aislamientos se obtuvieron principalmente en verano y otoño, observándose además concentraciones más elevadas en estas épocas. Las concentraciones de Legionella superaron las 103 ufc/l en el 46.4% de las muestras positivas obtenidas de agua de consumo humano y en el 38.3% de las muestras positivas obtenidas de torres de refrigeración.
Para conocer las especies y serogrupos de Legionella dominantes en el ambiente se realizó un test basado en la microaglutinación con partículas de látex sensibilizadas con anticuerpos específicos frente a los antígenos de distintas especies y serogrupos de Legionella. Tanto en agua de consumo humano como en torres de refrigeración, la especie predominante fue L. pneumophila, siendo el serogrupo 1 el más frecuente.
Se llevó a cabo el análisis molecular mediante electroforesis en campo de pulsos (PFGE) con el fin de establecer la variabilidad genotípica de los aislamientos de Legionella y comprobar la persistencia de los distintos genotipos en cada una de las instalaciones durante el periodo de estudio. Se observó un patrón molecular mayoritario entre los aislados de L. pneumophila serogrupo 1. Por su parte, los aislados de L. pneumophila serogrupo 2-14 y Legionella no-pneumophila en torres de refrigeración presentaron una gran diversidad genética. En cuanto al estudio de la persistencia se detectó que L. pneumophila, principalmente L. pneumophila serogrupo 1, persistió durante varios meses en la mitad de los puntos de agua de consumo humano y de las torres de refrigeración.
En este trabajo también se realizó el estudio de la virulencia de las cepas de Legionella aisladas en muestras ambientales y en muestras humanas detectando la presencia de los genes de virulencia lvh y rtxA mediante la reacción en cadena de la polimerasa y el crecimiento intracelular en Acanthamoeba polyphaga y células "macrophages-like U-937". Entre las muestras ambientales se observó que en el 81% de las cepas de L. pneumophila y en el 14.3% de las cepas de Legionella no-pneumophila se detectaron los genes de virulencia lvh y/o rtxA. Como parte de este estudio se llevó a cabo una investigación clínico-epidemiológica tras la que se concluyó que el agua de consumo humano fue la fuente de infección de un caso de legionelosis mortal ocurrido en Murcia. Además, no se encontraron diferencias en la capacidad de replicación intracelular en A. polyphaga y células "macrophages-like U-937" entre los aislamientos procedentes de muestras clínicas y muestras ambientales, lo cual hace pensar en la posible importancia del agua de consumo humano como reservorio y fuente de infección, especialmente en pacientes inmunodeprimidos.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UM/oai:www.tdx.cat:10803/117663 |
| Date | 11 February 2011 |
| Creators | Salvador García, Carme |
| Contributors | Segovia Hernández, Manuel, Yagüe Guirao, Genoveva, Universidad de Murcia. Departamento de Genética y Microbiología |
| Publisher | Universidad de Murcia |
| Source Sets | Universidad de Murcia |
| Language | Spanish |
| Detected Language | Spanish |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 248 p., application/pdf |
| Source | TDR (Tesis Doctorales en Red) |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess, ADVERTENCIA. El acceso a los contenidos de esta tesis doctoral y su utilización debe respetar los derechos de la persona autora. Puede ser utilizada para consulta o estudio personal, así como en actividades o materiales de investigación y docencia en los términos establecidos en el art. 32 del Texto Refundido de la Ley de Propiedad Intelectual (RDL 1/1996). Para otros usos se requiere la autorización previa y expresa de la persona autora. En cualquier caso, en la utilización de sus contenidos se deberá indicar de forma clara el nombre y apellidos de la persona autora y el título de la tesis doctoral. No se autoriza su reproducción u otras formas de explotación efectuadas con fines lucrativos ni su comunicación pública desde un sitio ajeno al servicio TDR. Tampoco se autoriza la presentación de su contenido en una ventana o marco ajeno a TDR (framing). Esta reserva de derechos afecta tanto al contenido de la tesis como a sus resúmenes e índices. |
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