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Purificação e caracterização parcial de uma enzima trombina-símile da peçonha da serpente Bothrops leucurus (viperidae)

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Previous issue date: 2006 / A serpente Bothrops leucurus (jararaca do rabo branco), maior responsável pelos
acidentes botrópicos no Estado da Bahia, também tem ocorrência registrada em
Pernambuco. As alterações na coagulação sangüínea são uma característica relevante no
envenenamento provocado pela peçonha de B. leucurus. Enzimas ofídicas que atuam
estrategicamente na hemostasia com ação direta sobre o fibrinogênio, convertendo-o em
fibrina, são chamadas trombina-símile. Apesar de estarem presentes em diversas
peçonhas botrópicas e representarem modelos moleculares para o desenvolvimento de
novas drogas e reagentes, poucos estudos têm sido realizados com estas toxinas,
inclusive com a peçonha de B. leucurus. Neste trabalho foi realizada a purificação e
caracterização parcial de uma toxina trombina-símile da peçonha de B. leucurus. A
enzima trombina símile foi obtida a partir do fracionamento de 600 mg da peçonha total
de B. leucurus em quatro etapas de purificação: troca iônica em Mono-Q, afinidade em
Benzamidina-Sepharose, gel filtração em TSK-G3000 SW e fase reversa em C4. A
toxina purificada, denominada BL-TL I, teve um rendimento final de 0,05% e
apresentou cadeia única de massa molecular 23 e 31,8 KDa, conforme estimativa em
SDS-PAGE em condições não redutoras e redutoras, respectivamente. BL-TL I teve sua
atividade parcialmente reduzida após cromatografia em coluna C4, não apresentando
atividade sobre os substratos S-2238 e S-2765, bem como ativadora de fator X. Por
outro lado, mesmo com reduzida atividade coagulante sobre fibrinogênio, a BL-TL1 foi
capaz de hidrolisar o substrato S-2222. A BL-TL1 é a primeira enzima trombina-símile
purificada da peçonha de B. leucurus, porém outra técnica complementar deve ser
estabelecida para obtenção da toxina com atividade total para estudos subseqüentes,
com o intuito de complementar a caracterização da referida toxina.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/680
Date January 2006
CreatorsARAÚJO, Ilca Priscila de
ContributorsGUARNIERI, Míriam Camargo
PublisherUniversidade Federal de Pernambuco
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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