Syftet med denna studie var att utveckla en separations- och analysmetod för identifiering av icke-volatila substanser från strån och rötter av de gräsliknande växterna Cyperus rotundus och Panicum repens. För analysen användes högpresterande vätskekromatografi (HPLC) och ultrahögpresterande vätskekromatografi (UHPLC) med en opolär stationär fas (RP-HPLC) med ultraviolett ljus (UV) och elektrosprej masspektrometri detektion (ESI-MS). Proverna extraherandes med hjälp av ultraljuds assisterad extraktion (UAE) och koncentrerades med solid fasextraktion. Två olika metoder användes vid extraktionen antingen sänktes gräset i 10 ml acetonitril två gånger eller så direkt i 20 ml acetonitril. På grund av svårigheten att uppnå reproducerbarhet vid extraktion med samma metod kunde ingen slutsats om någon metods fördelar dras. Under utvecklingen av HPLC metoden testades två olika elueringsmedel metanol och acetonitril i kombination med MilliQ-vatten. Den slutgiltiga metoden börjar med en mobilfas innehållande 70% metanol och 30% vatten under 5 min för att sedan öka till 100% metanol under 10 minuter innan mobilfasen hålls vid 100% metanol under 25 minuter. Med UV-detektorn kräver identifikation av de okända komponenterna krävde kända referenser. Vidare undersökningar genomfördes därför med masspektrometri. Dock så var det begränsad tid kvar för undersökningar med MS så få körningar kunde genomföras, därav kunde inte analyterna analyseras tillräckligt för att kunna identifiera komponenterna från Cyperus rotundus. Vidare analyser med MS samt även kopplad MSMS där spektrum kan jämföras med en databas för identifikation skulle underlätta identifikationen. / The aim of this study is to develop an analysis method for the separation and identification of non-volatile substances from the Cyperus rotundus and- Panicum repens roots and shoots. For the analysis reversed phase high performance liquid chromatography (HPLC) and ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC) methods where used. First an UV detector was used in combination with the HPLC setup and in the later stages access to an electrospray ionization ion trap mass spectrometer was enabled for coupling to UHPLC. The samples were extracted with ultrasound assisted extraction (UAE) and the concentrated with solid phase extraction (SPE). Two different extraction methods were attempted one where the graminoid plants where submerged in 10 ml acetonitrile twice and the other with 20 ml directly. Due to the difficulty of reproducing result between different extraction batches no conclusion on whether either method is superior could be made. For the development of the HPLC method methanol or acetonitrile was used in combination with ultrapure (MilliQ) water. The final eluationprogram was 70% methanol and 30% MilliQ water for five minutes, increasing linearly over 10 minutes to 100% methanol and then running for 25 minutes. With the UV detector no identification was possible, so further investigations were performed with UHPLC-MS for analysis of the mass of the analytes. Due to time limitations only a few MS analyses on the Cyperus rotundus were performed, and only a few masses could be estimated. Further runs of the samples need to be performed in combination with coupled MSMS to be able to identify the analytes in the samples.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:kth-321143 |
| Date | January 2022 |
| Creators | Flygar, Jakob |
| Publisher | KTH, Kemi |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | TRITA-CBH-GRU ; 2022:294 |
Page generated in 0.0025 seconds