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Análise de celulases e xilanases por fungo isolado a partir do bioma cerrado / Analysis of fungal cellulases and xylanases isolated from cerrado biome

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Previous issue date: 2013-05-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lignocellulosic biomass is constituted by cellulose, hemicellulose and lignin in the
plant cell walls. The conversion of lignocellulose to fermentable sugars mainly depends
on the action of a complex of enzymes that hydrolyze cellulose and hemicellulose. This
study was to analyze the production of cellulases and xylanases by fungi isolated from
soil and decaying material in Cerrado. Initially, the fungi were analyzed for cellulase
production capacity among the fungal cellulase-producing fungus capable of producing
the highest levels of cellulase was selected for the experiments of xylanase and cellulase
production by submerged fermentation and biochemical analysis of the enzyme
secreted. Among the isolated fungi, fungus called IFBMD01 was that higher activity of
cellulase in the supernatant when cultivated with wheat bran as carbon source. This was
identified as Aspergillus cf niger. The enzymes studied with their respective results
were: FPase with better production time of 7 days, showing activity of 0.10 U / mL,
optimum pH 5.5, optimum temperature of 60 ° C; CMCase with better time production
6 days, showing activity of 8.19 U / mL, pH optimum of 5, optimum temperature of 70 º
C; Avicelase with better production time of 9 days, showing activity of 0.01 U / mL, pH
optimum of 5.5 and optimum temperature of 60 ° C; xylanase, with better production
time 3 days, showing activity of 35.5 U / mL, and the optimum pH of 5 and the
optimum temperature of 50 ° C, the β-Glycosidase, with higher production on the sixth
day showing activity of 0.98 U / mL, with the optimum pH 5 and optimum temperature
of 60 ° C. The activity of β-glucosidase showing in the culture supernatant was
influenced by the ions Mn2 +, NH4, K +, Mg2 +, Ca2 +, Ba2 +, Al3 +, Na +, and Co2+, as
well as EDTA, glucose, xylose and cellobiose. In the culture supernatant of the fungus
A. niger IFBMD01 grown on FT for 3 and 6 days protein bands were visualized with
activity against xylan and CMC molecular weight be 30 to be 66 kDa. / A biomassa lignocelulósica é constituída pela celulose, hemicelulose e lignina,
presentes na parede das células vegetais. A xilana é o principal componente da fração de
hemicelulose da lignocelulose. A conversão da lignocelulose à açúcares fermentáveis é
realizada por um complexo de celulases e xilanases: enzimas que hidrolisam as frações
de celulose e xilana. O objetivo deste trabalho foi analisar a produção de celulases e
xilanases por fungos isolados a partir de solo e material em decomposição do Bioma
Cerrado. Inicialmente, os fungos foram analisados quanto à capacidade de produção de
celulases por atividade em placa, neste experimento, os fungos produtores de maiores
níveis de celulases foram selecionados para os experimentos de produção de celulases e
xilanases por fermentação submersa utilizando meio suplementado com resíduos
lignocelulósicos como fonte de carbono. Dentre os fungos analisados, o isolado
IFBMD01 apresentou maior atividade de celulases e xilanases no sobrenadante de
cultura do fungo cultivado em meio com farelo de trigo, sendo que o pico de produção
FPAses, CMCases, Avicelases e xilanases foram obtidos após 7, 6, 9 e 3 dias de cultivo
respectivamente. A caracterização bioquímica das celulases e xilanases produzidas pelo
isolado IFBMD01 demonstrou que: as enzimas com atividade de FPase apresentaram
atividade de 0,10 U/mL, pH e temperatura ótimos de 5,5e 60ºC; as CMCases
apresentaram atividade de 8,19 U/mL, pH ótimo de 5 e temperatura ótima de 70ºC; as
Avicelases apresentaram atividade de 0,01 U/mL, pH ótimo de 5,5 e temperatura ótima
de 60ºC; as xilanase apresentaram atividade de 35,5 U/mL, sendo o pH ótimo de 5 e a
temperatura ótima de 50ºC e as β-glicosidases apresentaram atividade de 0,98 U/mL,
com o pH ótimo de 5 e temperatura ótima de 60ºC. A atividade de β-glicosidase
presente no sobrenadante de cultura foi influenciada pelos íons Mn2+, NH4, K+, Mg2+,
Ca2+, Ba2+, Al3+, Na+ e Co2+, assim como por EDTA, glicose, xilose e celobiose. No
sobrenadante de cultura do isolado IFBMD01 cultivado em FT por 3 e 6 dias foram
visualizadas bandas de proteínas com atividade contra xilana e CMC, com massa
molecular aproximada de 30 a 66 kDa. A identificação morfológica e molecular do
isolado IFBMD01 demonstrou que é um isolado de Aspergillus cf niger.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/3587
Date06 May 2013
CreatorsPereira, Douglas Endrigo Perez
ContributorsBataus, Luiz Artur Mendes, Faria, Fabrícia Paula de, Bataus, Luiz Artur Mendes, Faria, Fabrícia Paula de, Jesuíno, Rosália Santos Amorim, Fonseca, Marcio José Poças
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Genética e Biologia Molecular, UFG, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess
Relation7015780075895009588, 600, 600, 600, 600, -3872772117827373404, -6955993663990014189, 2075167498588264571

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