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Previous issue date: 2004 / Com a utilização clínica de agentes antimicrobianos começaram a surgir
bactérias resistentes a diversos antibióticos, entre os quais, se destacam os β-
lactâmicos. A hidrólise do anel β-lactâmico pelas enzimas β-lactamases é o
mecanismo de resistência bacteriana mais bem documentado. A obtenção de
Streptomyces produtores de inibidores de tais enzimas constitui uma
importante estratégia para contornar o problema da resistência bacteriana,
garantindo a continuidade da terapia antimicrobiana com os β-lactâmicos. Com
este objetivo, 19 linhagens de Streptomyces spp, pertencentes a Coleção de
Microrganismos do Departamento de Antibióticos da UFPE (DAUFPE), isoladas
de solos e preservadas em óleo mineral foram testadas quanto a capacidade
de inibir a ação de β-lactamases produzidas por Klebsiella aerogenes ATCC
15380. As 19 linhagens foram purificadas utilizando-se os meios ISP-1 e TSB e
submetidas à seleção primária pelos métodos de difusão em ágar, utilizando
bloco de gelose e cultivo em meio sólido nos meios CAA e ISP-2. No meio
CAA, 15% das linhagens formaram halo de inibição, com 10 a 12 mm de
diâmetro e 10% formaram halos maiores que 20 mm de diâmetro. No meio ISP-
2, 5% das linhagens formaram halo de 12 mm de diâmetro e 11% halos de 17
mm de diâmetro. A partir destes ensaios, cinco linhagens (DAUFPE 3036,
DAUFPE 3060, DAUFPE 3094 DAUFPE 3098 e DAUFPE 3133) que formaram
os maiores halos de inibição, foram selecionadas para ensaio em meio líquido
usando meios de cultura sintéticos ou quimicamente definidos e complexos. As
fermentações foram realizadas a 300C e 200rpm durante 96 horas. As
amostras retiradas em intervalo de tempo pré-definido foram submetidas à
centrifugação a 11000 rpm por 5 minutos, para a separação do líquido
metabólico, o qual foi submetido a determinação de pH, atividade
antimicrobiana e ácido clavulânico, sendo este um potente inibidor de β-
lactamases. Observou-se que o melhor meio para produção de inibidor de β-
lactamase foi o MPE modificado, em que todas as linhagens apresentaram
atividade antimicrobiana contra Klebsiella aerogenes ATCC 15380. Com
relação à produção de ácido clavulânico, três linhagens (DAUFPE 3036,
DAUFPE 3060 e DAUFPE 3094) apresentaram resultado positivo em dois
meios de cultura (MPE modificado e meio com glicerol), enquanto que as duas
linhagens restantes (DAUFPE 3098 e DAUFPE 3133) produziram outros
inibidores
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1493 |
| Date | January 2004 |
| Creators | Maria Sobral de Oliveira, Patrícia |
| Contributors | Magali de Araújo, Janete |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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