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bertanha_m_me_botfm.pdf: 4042528 bytes, checksum: cdc59622a6658e29d1187a28f3ccdba1 (MD5) / Ministério da Saúde / O cultivo de células tronco (CT) e a descoberta de técnicas que promovem a diferenciação tecidual apontam para novos domínios da medicina: a terapia celular e a engenharia de tecidos (ET). As limitações da medicina atual encontram na ET uma nova possibilidade terapêutica, com tratamentos regenerativos ou substitutivos para os tecidos danificados. Dentre as limitações médicas encontram-se as doenças arteriais obstrutivas periféricas (DAOP). A DAOP está presente em 5% da população e cerca de 20 a 30% dos casos podem evoluir para amputação do membro inferior acometido, mesmo com os tratamentos hoje existentes. A ET apresenta-se como uma ferramenta promissora para a resolução dos problemas cardiovasculares, particularmente para os que afetam as artérias de pequeno diâmetro (<5 mm), sendo factível a produção de enxertos vasculares autólogos, sob a ótica da medicina personalizada. O objetivo deste trabalho foi construir de um modelo experimental de vaso sanguíneo para enxerto, utilizando técnicas de ET para a diferenciação de células tronco mesenquimais de tecido adiposo (CTMta) em células endoteliais. Inúmeras etapas metodológicas foram necessárias: identificação da melhor forma de descelularizar as veias de animais doadores para confecção do arcabouço (scaffold), onde foram comparados 3 diferentes protocolos utilizando os detergentes Triton X-100, deoxicolato de sódio (DS) e dodecil sulfato de sódio (SDS); obtenção, expansão e caracterização por citometria de fluxo com anti-CD90 de CTMta; comprovação da adesão das CTMta sobre o scaffold utilizando imunofluorescência e o kit Qtracker; estabelecimento do índice de apoptose das CTMta sobre o scaffold descelularizado por eventual resíduo químico; análise histológica por HE e realização de imunohistoquímica com... / Stem cells (SC) cultivation and the development of new techniques to promote tissue differentiation evolved to new medicine fields of research: cell therapy and tissue engineering (TE). The current limitations in medicine rely on TE for new therapies as they provide regeneration and substitution of the damaged tissue. Within therapeutic limitations are the peripheral arterial obstruction diseases (PAD). PAD affects 5% of population and about 20-30% of cases may progress to amputation of the limb, even if the treatments that exist today. TE is a promising tool for cardiovascular diseases, especially those where the vessel is a small caliber artery (<5 mm), as it is possible to recreate the structure of the vessel with autologous vascular grafts from the perspective of personalized medicine. This research aimed to propose the creation of an experimental blood vessel using TE techniques and adipose-derived stem cell differentiation into endothelium. Several techniques were required: to gather enough veins and remove its cells, using three different protocols with Triton X 100, sodium deoxycholate (SD) and sodium dodecil sulfate (SDS); to obtain, cultivate and characterize adipose-derived stem cells with the CD90 marker and flow citometry; to prove the cells could adhere to the scaffold using immunofluorescence and Qtracker kit; to establish the cell apoptosis on the scaffold for possible chemical residue; histology and immunohistochemistry on the cell seeded scaffold using the fascin marker. Were obtained 90 jugular and cava vein segments and were decellularized, withing 11 different protocols. The best protocols were 2h of 1% SD, 1h of 2% SDS and 2h of 1% SDS. The protocols where triton were used gave no good results. There was no relevant difference between the apoptosis on the best... (Complete abstract click electronic access below)
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unesp.br:11449/88060 |
| Date | 04 October 2011 |
| Creators | Bertanha, Matheus [UNESP] |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista (UNESP), Deffune, Elenice [UNESP], Sobreira, Marcone Lima [UNESP] |
| Publisher | Universidade Estadual Paulista (UNESP) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 87 f. |
| Source | Aleph, reponame:Repositório Institucional da UNESP, instname:Universidade Estadual Paulista, instacron:UNESP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -1, -1, -1 |
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