Carotenoids are natural pigments soluble inversely associated with risk of a variety of
diseases. In the Amazon region there is a wide variety of native fruits which are rich in
carotenoids, which functional properties need to be clarified. This is the case of the fiber palm
fruits (Astrocaryum aculeatum Mart.), regionally consumed. Therefore, we investigated the
protective effects of ethanol extract isolated from the peel and the pulp of fruits tucumã
against cytotoxicity and DNA damage induced by H2O2 in human lymphocytes and
antiproliferative activity against the same cell lineage Acute Promyelocytic Leukemia (APL),
NB4- APL, with and without concurrent exposure to all-trans retinoic acid (ATRA), drug
used for the treatment of APL, thus constituting the subjects of the first and second article of
this thesis. Firstly, the main chemical compounds present in the extracts were determined by
chromatographic and spectrophotometric methods. The bark extract showed higher
concentration of total polyphenols, flavonoids, alkaloids, tannins, β-carotene and quercetin
than extract pulp of tucumã . Cultures of human lymphocytes with and without H2O2 and
NB4 cells, APL was obtained after 72h and cell viability assay Picogreen® DNA, as well as
the activity of caspase 1, 3 and 8 related to events of apoptosis was assessed by immunoassay
tests. In cultures of human lymphocytes with and without H2O2 treated with the extracts of
the skin and pulp of the present tucumã showed that both cytologic and genoprotetor effect
especially in intermediate doses (300 to 900 ug / ml) when compared to lower and higher
concentrations. The extracts were able to largely decrease the activity of caspases 1, 3 and 8
which were higher in cells exposed to H2O2. These results suggest a positive effect of
tucumã in cells exposed to toxic compounds. When submitted to culture the LPA-NB4 cells
to the treatment with the ethanolic extract of the pulp and the peel of tucumã 72 hours after
the cell proliferation in concentrations greater than 600 mg / ml was effective at inhibiting cell
proliferation. When NB4 cells were treated with ATRA showed a strong inhibitory effect as
expected (14.5 ± 2.7% of control). Despite extracts also present tucumã antiproliferative
effect on NB4 cells, this effect was more moderate than ATRA. The levels of caspases tested
were shown to be higher in extracts of ATRA and tucumã indicating that it can trigger
apoptosis in NB4 cells. These results suggest that fruits rich in retinoids may have cytotoxic
effects against APL cells. / Os carotenoides são pigmentos naturais solúveis inversamente associados com o risco
de uma variedade de doenças. Na região da Amazônia há uma grande variedade frutos nativos
ricos em carotenoides, cujas propriedades funcionais precisam ser esclarecidas. Este é o caso
dos frutos de palmeira tucumã (Astrocaryum aculeatum Mart.), regionalmente consumido.
Portanto, nós investigamos os efeitos protetores do extrato etanólico isolados de casca e polpa
de frutas tucumã contra citotoxicidade e dano ao DNA induzido por H2O2 em linfócitos
humanos e a atividade antiproliferativa dos mesmos frente a linhagem celular de Leucemia
Promielocítica Aguda (LPA), NB4-LPA, com e sem exposição concomitante ao ácido alltrans-
retinóico (ATRA), fármaco utilizado para o tratamento da LPA, constituindo assim os
temas do primeiro e segundo artigo da tese. Em primeiro lugar, os compostos químicos
principais presentes nos extratos foram determinados através de métodos cromatográficos e
espectrofotométrico. O extrato da casca apresentou maior concentração de polifenois totais,
flavonoides, alcaloides, taninos, β-caroteno e quercetina do que extrato de polpa de tucumã.
As culturas de linfócitos humanos, com e sem H2O2 e as células NB4-LPA foram obtidas após
72h e a viabilidade das células, o ensaio do DNA Picogreen®, assim como a atividade das
caspase 1, 3 e 8 relacionadas com acontecimentos de apoptose foi avaliada por meio de testes
de imunoensaio. Nas culturas de linfócitos humanos, com e sem H2O2 tratados com os
extratos obtidos da casca e da polpa do tucumã mostraram que ambos apresentaram efeito cito
e genoprotetor principalmente em doses intermediárias (300 a 900 μg/mL) quando comparado
com concentrações inferiores e superiores. Os extratos foram capazes de diminuir a grande
parte da atividade das caspases 1, 3 e 8 que eram mais elevadas em células expostas a H2O2.
Estes resultados sugerem efeito positivo do tucumã em células expostas a compostos tóxicos.
Quando submetemos à cultura as células NB4-LPA frente ao tratamento com os extratos
etanólicos da polpa e casca do tucumã depois de 72h a proliferação celular nas concentrações
maiores que 600 μg/mL foram eficazes para inibir a proliferação celular. Quando as células
NB4 foram tratadas apenas com ATRA mostrou-se um forte efeito inibitório como esperado
(14,5 ± 2,7% do grupo controle). Apesar dos extratos do tucumã também apresentarem efeito
antiproliferativo sobre células NB4, este efeito foi mais moderado do que o ATRA. Os níveis
das caspases testadas mostraram-se altas na presença de extratos de tucumã e ATRA
indicando que o tucumã é capaz de desencadear apoptose em células NB4. Estes resultados
sugerem que frutas ricas em retinoides podem apresentar efeito citotóxico contra células de
LPA.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsm.br:1/3860 |
| Date | 17 December 2014 |
| Creators | Sagrillo, Michele Rorato |
| Contributors | Cruz, Ivana Beatrice Mânica da, Santos, Roberto Christ Vianna, Barreto, Katia Padilha, Fachinetto, Roselei, Duarte, Marta Maria Medeiros Frescura |
| Publisher | Universidade Federal de Santa Maria, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, UFSM, BR, Farmacologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFSM, instname:Universidade Federal de Santa Maria, instacron:UFSM |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 201000000000, 400, 300, 300, 300, 300, 300, 300, 0b5fcfe0-b017-4163-80e2-17c110fbcf01, d0fc9d7e-5638-468e-b4e4-fb607cfe4575, a269af39-b3ff-4399-b1b5-aa61351e6aaf, 7d233f19-66ff-4aca-a9fc-784eddf6b946, ac49375d-6301-42f1-adc2-c0c475db11fc, ca139a66-990f-40fc-9fe9-c24e2cd83c8a |
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