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Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Uma lectina da entrecasca de Sebastiania jacobinensis (SejaBL) foi isolada por
combinação de precipitação acetônica, fracionamento salino, cromatografia de troca iônica
e gel filtração. A massa molecular de SejaBL foi determinada por SDS-PAGE e gel
filtração, sendo de 52,0 kDa e 50,0 kDa, respectivamente. A lectina é uma glicoproteína
com teor de carboidrato neutro de 6,94%, composta por duas subunidades com mesma
massa molecular de 24 kDa. A lectina purificada hemaglutinou hemácias de coelho e
humana. Glicoproteínas inibiram a hemaglutinação. SejaBL apresentou atividade máxima
na faixa de pH 3,0-7,5, estabilidade térmica até 70 °C e é potencial inibidor da atividade da
tripsina. Espectroscopia de fluorescência indicou a existência de superfícies hidrofóbicas.
Lectina inibiu o crescimento micelial de Fusarium moniliforme e Fusarium oxysporum com
um IC50 de 123±0,5μg e 303±0,9μg, respectivamente. Organismos não alvos, larvas
Artemia salina e embriões de Biomphalaria glabrata, não foram afetados, indicando baixa
toxicidade ambiental. Como modelo experimental, a lectina purificada de S. jacobinensis
(SejaBL) foi utilizada como prova de que mudanças no centro hidrofóbico, causados pela
irradiação gama, alteram estruturalmente proteínas. Para elucidar o efeito dos radicais livres
nas propriedades moleculares de SejaBL atividade, estrutura terciária (intrínseca e bis-ANS
fluorescência), massa molecular e perfil cromatográfico foram examinados após -
irradiação em várias doses (0,020 a 35kGy). Atividade hemaglutinante específica (AHE),
na lectina irradiada, mostrou perda significativa (p<0,05) acima de 12,5kGy e aumento
significativo (p<0,05) em 0,1, 0,8 e 1kGy. Espectroscopia de fluorescência indicou
supressão da emissão de fluorescência quando excitado a 280 e 295nm, com elevada
ligação do bis-ANS, após altas doses. SDS-PAGE e HPLC-RP mostraram fragmentação
polipeptídica. Mudança significativa na superfície hidrofóbica indicou captação de
hidrogênio radical em aminoácidos, causando desorganização estrutural da lectina.
Flavonóides são produtos secundários de plantas com capacidade para capturar radicais
livres. A lectina da entrecasca de S. jacobinensis (SejaBL), proteína capaz de ligar a
carboidrato, tem sua superfície hidrofóbica modificada por radicais livres produzidos pela
água radiólise. No presente estudo, o efeito protetor sobre a proteína pela estabilidade
antioxidante de flavonóides da entrecasca de S. jacobinensis (SejaBF), após irradiação
gama, foi investigada. Dois flavonóides foram isolados com rápida recuperação da
capacidade para capturar radical mensurado pelo 2,2-difenil-1-picrilhidracilo radical
(DPPH) a 0,5 mg/mL, após alta dose de irradiação. Os danos causados por irradiação na
AH foi minimizado em 55% na presença dos flavonóides. Os resultados mostraram
radioestabilidade da capacidade antioxidante de SejaBF, protegendo a lectina de radicais
livres após irradiação
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/1519 |
| Date | 31 January 2009 |
| Creators | Fernando de Melo Vaz, Antônio |
| Contributors | Tereza dos Santos Correia, Maria |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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