Tectiviridae šeimos bakteriofagas PRD1, infekuojantis dauginiu atsparumu antibiotikams pasižyminčias gramneigiamąsias bakterijas, patekimui į ląstelę naudoja viriono viduje esančią membraną. Manoma, kad šio bakterijų viruso membrana patekimo metu suliejama su infekuojamų ląstelių plazmine membrana. Deja, tiesiogiai įrodyti, kad faginė membrana susilieja su infekuojamų bakterijų plazmine membrana yra sudėtinga. Registruodami fago sukeliamas TPP+ ir K+ sroves bei tirdami membranose aktyvių antibiotikų poveikį membranos įtampai ir kalio jonų gradientui pabandėme ištirti Salmonella enterica ląstelių plazminės ir išorinės membranų laidumo pokyčius pradiniame infekcijos etape ir nustatyti infekcijos terpės fizikocheminių savybių įtaką bakteriofago PRD1 sąveikai su S. enterica ląstelėmis. Bakteriofagas PRD1, infekuodamas Salmonella enterica ląsteles, didina išorinės membranos laidumą, bet nedepoliarizuoja jų plazminės membranos. 300 OsmM ir didesnis infekavimo terpės osmosinis slėgis bei 22 oC ir žemesnė temperatūra slopina bakteriofago PRD1 poveikį Salmonella enterica ląstelių apvalkalėlio laidumui. Skirtingai nuo giminingo bakteriofago Bam35 infekcijos poreikių, dvivalenčiai katijonai nėra reikalingi fago PRD1 sąveikai su S. enterica ląstelių apvalkalėliu pradiniuose infekcijos etapuose. Dvivalenčių katijonų kompleksonai net skatina membranas laidinantį fago PRD1 poveikį, o Ca2+ ir Mg2+ jonai šiek tiek slopina plazminės membranos laidinimą. Arsenatas slopina PRD1 poveikį... [toliau žr. visą tekstą] / Bacteriophage PRD1 from Tectiviridae family uses its internal membrane to enter the host multiple resistant to antibiotics Gram-negative bacteria. Some indirect evidences indicate that during the entry phage membrane fuses with the plasma membrane of bacterial cell. However, it is very complicated to get the direct evidences or indications of the membrane fusion in this system. Monitoring the phage-induced fluxes of TPP+ and K+ ions and studying the influence of membrane-active antibiotics on membrane voltage and potassium gradient we were investigating PRD1-induced changes in the permeability of the outer and the plasma membranes of Salmonella enterica cells and registering the influence of physicochemical parameters of infection medium on the efficiency of phage-cell interaction. We have shown that phage PRD1 increases permeability of the outer membrane but does not depolarize the plasma membrane during the entry. 300 OsmM and higher osmotic pressure in the infection medium and temperature lower than 22 oC blocks the phage induced changes in bacterial envelope. Differently from the relative bacteriophage Bam35, divalent cations are not needed for PRD1 entry. Complexones of divalent cations EDTA and EGTA stimulate, but Ca2+ ir Mg2+ slightly inhibit the plasma membrane-permeabilizing activity of PRD1. Arsenate inhibits PRD1 induced changes of the cell envelope and the reduced intracellular ATP content could be the reason. Bacteriophage-induced lysis of S. enterica cells is... [to full text]
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LABT_ETD/oai:elaba.lt:LT-eLABa-0001:E.02~2008~D_20110709_152249-18943 |
| Date | 09 July 2011 |
| Creators | Juzėnaitė, Ana |
| Contributors | Daugelavičius, Rimantas, Vilnius University |
| Publisher | Lithuanian Academic Libraries Network (LABT), Vilnius University |
| Source Sets | Lithuanian ETD submission system |
| Language | Lithuanian |
| Detected Language | English |
| Type | Master thesis |
| Format | application/pdf |
| Source | http://vddb.laba.lt/obj/LT-eLABa-0001:E.02~2008~D_20110709_152249-18943 |
| Rights | Unrestricted |
Page generated in 0.0017 seconds