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Efecto in vitro de bioantagonistas en cepas de basidiomycotas aislados de vid (Vitis vinifera L.) con síntomas de degradación de la madera / In vitro effect of biocontrol agents against basidiomycotas strains isolated from grapevine (Vitis vinifera L.) with wood degradation symptoms

Memoria para optar al Título Profesional de: Ingeniero Agrónomo / Se evaluó la capacidad bioantagónica in vitro de diferentes bacterias (Bacillus
sp. cepa 1; Paenibacillus sp. cepas 1 y 2) y hongos (cepas 24-A y 24-B de Clonostachys
rosea; cepas Th 650, Th 12A 10.1 y ThF 2-1 de Trichoderma harzianum) y los
productos comerciales Actinovate® (Streptomyces lydicus WYEC 108) y Trichonativa®
(Trichoderma virens, Trichoderma harzianum y Trichoderma parceramosum) en el
control de 13 cepas de basidiomycotas recuperadas desde plantas de vid con síntomas
de enrollamiento clorótico y degradación de la madera, provenientes de 3 regiones de
Chile (IV Región de Coquimbo, V Región de Valparaíso y RM de Chile). Se
caracterizaron las diferentes cepas de hongos aislados respecto a temperatura (19, 22, 25
y 28ºC) y pH (5, 6, 7 y 8). La capacidad bioantagónica se determinó a través de pruebas
de antagonismo directo realizado mediante cultivos duales y antagonismo por
metabolitos difusibles. En los resultados de caracterización de las cepas recuperadas, se
observó que el mayor crecimiento miceliar se obtuvo a 28ºC a un pH 6 del medio,
determinándose ambos valores como los óptimos para el desarrollo de los aislados
investigados. Acorde con los resultados obtenidos en antagonismo directo, todos los
bioantagonistas demostraron tener un cierto grado de capacidad antagónica sobre las
cepas. Mediante la inhibición del crecimiento miceliar, la bacteria que presentó un
mayor efecto fue la cepa 1 de Paenibacillus sp., con un máximo de 63,5% de inhibición.
En el caso de los hongos fueron todas las cepas de T. harzianum utilizadas, oscilando el
máximo porcentaje de control entre un 82,7% para la cepa Th 650, un 84,6% para Th
12A 10.1 y 87,7% para la cepa ThF 2-1. En relación a los productos comerciales,
Trichonativa® logró un 61,5% de inhibición miceliar, mientras que Actinovate® logró
un 100% de inhibición, siendo por lo tanto S. lydicus WYEC108 el antagonista que
ejerció el mayor efecto. Los resultados obtenidos en el ensayo de antagonismo mediante
metabolitos difusibles ayudaron a corroborar el tipo de mecanismo de biocontrol que
ejercieron los antagonistas. Las bacterias utilizadas para este ensayo reflejaron que
básicamente son los metabolitos difusibles que producen, los que ejercen la inhibición
de crecimiento miceliar de las cepas de basidiomycotas, obteniéndose con ambas cepas
1, de Bacillus sp. y Paenibacillus sp., valores en promedio superiores a 70%; en
relación al producto comercial Actinovate®, se obtuvo una completa inhibición
miceliar. Con respecto a los hongos C. rosea 24-B y T. harzianum ThF 2-1, estos
mostraron una baja inhibición mediante la producción de metabolitos difusibles,
obteniéndose valores en promedio que no superaron el 14% de inhibición de
crecimiento miceliar, lo que indica que poseen otro tipo de mecanismos como en el caso
de las cepas de T. harzianum. Para el producto comercial Trichonativa®, se obtuvo en
promedio un 16,7% de inhibición miceliar, siendo éste el mayor dentro de los hongos.
Los resultados obtenidos señalan a S. lydicus WYEC108 (Actinovate®) como al
bioantagonista de mayor efecto. / The in vitro bioantagonistic capacity of different bacteria (Bacillus sp. strain 1,
Paenibacillus sp. strains 1 and 2) and fungi (24-A and 24-B strains of Clonostachys
rosea, and Th 650, Th 12A 10.1 and ThF 2-1 strains of Thrichoderma harzianum) and
of the biofungicides Actinovate ® (Streptomyces lydicus WYEC 108) and Trichonativa
® (Trichoderma virens, Trichoderma harzianum and Trichoderma parceramosum) was
evaluated in the control of 13 basidiomycota strains recovered from grapevines grown
in three regions of Chile (IV Region of Coquimbo, V Region of Valparaiso and
Metropolitan Region). The vines showed wood degradation and chlorotic leafroll
symptoms. Different isolated fungus strains were characterized with respect to
temperature (19, 22, 25, and 28ºC) and pH (5, 6, 7, and 8). The bioantagonistic capacity
was determined by tests of direct antagonism with dual cultures and by diffusible
metabolite antagonism. The results of recovered strain characterization showed that
mycelial growth was highest with the culture medium at 28ºC and pH 6, indicating both
values as optimum for the development of the investigated isolates. According to the
direct antagonism results, all bioantagonists demonstrated to have some degree of
antagonistic capacity over recovered strains. Through mycelial growth inhibition, the
bacterium that showed a better effect was Paenibacillus sp. strain 1, with a maximum of
63.5% of inhibition. In the case of fungi, all the used T. harzianum strains had excellent
results with the highest control percentages being 82.7% for the Th 650 strain, 84.6%
for the Th 12A 10.1 strain and 87.7% for ThF 2-1 strain. In relation to the biofungicides
tested, Trichonativa ® achieved a maximum of 61.5% of mycelial inhibition, while
Actinovate ® showed 100% of inhibition of the 13 basidomycota strains. The results
obtained in the antagonism trial by diffusible metabolite helped to corroborate the type
of biocontrol mechanism exerted by the antagonists. The bacteria used for this trial
basically showed that the diffusible metabolites that they produce are the ones which
exert mycelial growth inhibition of basidiomycota strains, with both Bacillus sp. and
Paenibacillus sp. strains 1 showing average values over 70%. With respect to
Actinovate ®, complete mycelial growth inhibition was obtained with this biofungicide.
Regarding fungi C. rosea 24-B and T. harzianum ThF 2-1, these showed low inhibition
by diffusible metabolite production with average values not exceeding 14% of mycelial
growth inhibition, which indicates that they have other types of mechanisms as in the
case of T. harzianum strains. With Trichonativa ®, an average of 16.7% of mycelial
growth inhibition was obtained, this biofungicide being the higher within the fungi
used. The obtained results showed S. lydicus WYEC108 (Actinovate®) as the
bioantagonist with higher effect.

Identiferoai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/148917
Date January 2012
CreatorsSepúlveda Rubio, Claudio Ignacio
ContributorsMontealegre A., Jaime R., Auger S., Jaime G., Esterio. G., Marcela A.
PublisherUniversidad de Chile
Source SetsUniversidad de Chile
LanguageSpanish
Detected LanguageEnglish
TypeTesis
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/

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