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Previous issue date: 2006 / Lectinas são proteínas ou glicoproteínas de origem não-imune que se ligam
bioespecificamente a carboidratos, com capacidade de aglutinar células de forma reversível.
Folhas de plantas do gênero Bauhinia têm ampla utilização na medicina popular com
propriedades ditas hipoglicemiantes e diuréticas. Diversos extratos de folhas de Bauhinia
membranacea Benth demonstraram a presença de lectina, indicada pela atividade
hemaglutinante (AH). O objetivo deste trabalho foi a purificação da lectina de folhas de B.
membranacea (BmeLL) e sua imobilização em Sepharose CL-4B para isolar
glicoproteínas. Um extrato escolhido (10 %, p/v) foi preparado em tampão citrato fosfato
10 mM, pH 6,5, contendo cloreto de sódio 0,15 M (tampão selecionado), por 16 h, a 4 oC.
O extrato foi tratado com sulfato de amônio e a fração 0-80 % (F0-80%) foi selecionada
para realização dos experimentos de purificação devido à maior AH específica (AHE).
Cromatografia em coluna de gel de guar foi feita para purificar a lectina; a matriz foi
equilibrada com cloreto de sódio 0,15 M. Eluição da proteína foi feita com hidróxido de
sódio 0,02 M, pH 11. SDS-PAGE (8,5 %, p/v) revelou a pureza de BmeLL. A lectina
aglutinou a títulos altos eritrócitos de coelho e humanos e não foi estimulada em presença
de íons (Ca++, Mg++). BmeLL apresentou melhor AHE com tampão citrato fosfato 10 mM,
pH 6.0, contendo cloreto de sódio 0,15 M. Teste de temperatura revelou que BmeLL é uma
lectina termoestável. O perfil cromatográfico em gel filtração numa coluna de Sephacryl S-
300 mostrou um pico protéico principal. Caseína, fetuína, asocaseína, asialofetuína e
tiroglobulina aboliram a atividade da lectina. BmeLL imobilizada em Sepharose CL-4B foi
eficiente para ligar avidina e tiroglobulina como também, glicoproteínas da clara do ovo e
tireóide de porco. Preparações contendo BmeLL serão utilizadas em ensaios biológicos que
permitam avaliar seu papel como agente hipoglicemiante; BmeLL purificada será utilizada
para caracterizar superfícies celulares
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/2013 |
| Date | January 2006 |
| Creators | Pinheiro Fernandes, Mariana |
| Contributors | Cassandra Breitenbach Barroso Coelho, Luana |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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