Propriedades cineticas da treonil-tRNA sintetase de figado bovino. Reações de intercambio ATP-PPi E de aminoacilação

Description

Orientador : Hiroshi Aoyama / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:25:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1981 / Resumo: A treónil-Trna sintetase foi purificada de fígado bovino utilizando-se centrifugações diferenciais, saturação fracionada com sulfato de amônio e cromatografias em DEAE-celulose, hidroxiapatita e fosfocelulose. A purificação foi de cerca de 120 vezes, com renimento de 7%. A eletroforese em gel de poliacrilamida mostrou que a purificação não está totalmente homogênea. A enzima é mais estável a -20ºC em presença de 50% glicerol. Com esta enzima foram realizados estudos físicoquímicos com a finalidade de determinar alguns parâmetros cinéticos. Na reação de intercâmbio ATP-Ppi, onde a presença de tRNA não é necessária, e as especificidades pela treonina e pelo ATP são bastante altas, obteve-se KM(ATP)=1,1.10-4M; KM(treonina) = 1,2.10-4M; KM(pirofosfato) = 2,1.10-4M. Na reação de formação de treonil-tRNA foram obtidos KM(ATP) = 2,2.10-5M; KM(treonina)=4.10-6M; KM(tRNA) = 2,4.10-4M. Ambas as reações dependem de Mg2+ e são sensíveis a reagentes sulfidrílicos / Abstract: Threonyl-tRNA synthetase was extracted from beef liver and purified by differential centrifugations, neutral salt precipitation and chromatographic procedures. The degree of purification obtained about 120 fold, with a yield of 7%. The analysis by polyacrylamide electrophoresis has shown a small heterogeneity at the last step of the enzyme purification. The kinetic parameters were studied and the KM values determined: KM(ATP) = 1,1x10-4M; KM(threonine) = 1,2x10-4M and KM(PPi) =2.1x10-4M for ATP-Ppi exchange reaction. For threonyl-tRNA formation reaction the KM values found were? 2.2 a 10-5M (ATP)/ 4x10-6M (threonine) and 2.4x10-4M (tRNA). Both reactions were Mg2+ dependent and presented sensibility to sulfhydryl reagents / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Links & Downloads

1. (Broch.)
2. BARBOSA, Neuza Maria. Propriedades cineticas da treonil-tRNA sintetase de figado bovino. Reações de intercambio ATP-PPi E de aminoacilação. 1981. 89f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/318081>. Acesso em: 14 jul. 2018.
3. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/318081

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Biologia - Aplicação - Química

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Identifer	oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/318081
Date	14 July 2018
Creators	Barbosa, Neuza Maria, 1946-
Contributors	UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Aoyama, Hiroshi, 1943-
Publisher	[s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
Source Sets	IBICT Brazilian ETDs
Language	Portuguese
Detected Language	Portuguese
Type	info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Format	89f. : il., application/pdf
Source	reponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP
Rights	info:eu-repo/semantics/openAccess