Cells that cover the body’s inner and outer surfaces are called epithelial cells. Endothelial cells are specialised epithelial cells which, among other things, line the inside of blood vessels. The endothelium is anchored to the basement membrane through molecules called laminins. In an acute inflammation laminins can bind to leukocytes so that they can reach the inflamed tissue. Chemokines are molecules that attract leukocytes and can be synthesized by endothelial cells. This report will investigate what impact stimulation with laminin-332 on endothelial cells has on their gene expression for the chemokines CCL7, CCL8, CCL20, CXCL6 and CXCL10. A previously performed analysis for protein expression which had been performed under the same conditions revealed an upregulation of all chemokines except for CCL8, which was downregulated. The analysis for protein expression was executed with Olink’s Proximity Extension Assay and analysis of gene expression was carried out with qRT-PCR. The results revealed that gene expression for CCL8, CXCL6 and CXCL10 was under the detection limit for the chosen method. Gene expression for CCL7 and CCL20 was detectable and revealed an upregulation of gene expression for both genes, which was consistent with the results from the study that analysed protein expression. This led to the conclusion that stimulus with laminin-332 upregulates mRNA expression, protein production and protein secretion in human umbilical vein endothelial cells for chemokines CCL7 and CCL20. Lastly, the involvement of the chemokines CCL7 and CCL20 in inflammation and cancer diseases is explored as well as their potential role as a biomarker for clinical treatment. / Celler som täcker kroppens inre och yttre ytor kallas för epitelceller. Endotelceller är specialiserade epitelceller som bland annat bekläder insidan av blodkärlen. Endotelet är förankrat till basalmembranet via molekyler kallade lamininer. Vid en akut inflammation kan lamininer binda till leukocyter för att de ska kunna ta sig ut till den inflammerade vävnaden. Kemokiner är molekyler som attraherar leukocyter och som kan produceras av endotelcellerna. I denna rapport utforskas vilken påverkan som laminin-332 har på endotelcellers genuttryck för kemokinerna CCL7, CCL8, CCL20, CXCL6 och CXCL10. En tidigare utförd analys för proteinuttryck som gjorts under samma förhållanden visade en uppreglering av samtliga kemokiner, med undantag för CCL8 som blev nedreglerad. Analysen för proteinuttryck var utförd med Olinks Proximity Extension Assay och analys för genuttryck utfördes med qRT-PCR. Resultaten visade att genuttrycket för CCL8, CXCL6 och CXCL10 var för lågt för att detekteras med den valda metoden. Genuttryck för CCL7 och CCL20 var detekterbart och visade båda en uppreglering av genuttryck vilket överensstämde med resultatet från studien som analyserat proteinuttrycket. Detta ledde till slutsatsen att stimulans med laminin-332 uppreglerar uttryck av mRNA, proteinproduktion och proteinsekretion i humana venösa endotelceller från navelsträng för kemokinerna CCL7 och CCL20. Slutligen, utforskas involveringen av kemokinerna CCL7 och CCL20 vid inflammation och cancerassocierade sjukdomar samt vilken roll de kan spela som biomarkörer vid behandling.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:oru-92936 |
| Date | January 2021 |
| Creators | Bolaños, Amanda |
| Publisher | Örebro universitet, Institutionen för hälsovetenskaper |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0031 seconds