Blastocystis sp. é um protozoário comumente encontrado em amostras fecais de humanos e animais, envolto por aspectos patogênicos e zoonóticos ainda controversos. Estudos recentes têm demonstrado a distribuição dos subtipos (STs) de Blastocystis sp., porém são escassos os relatos sobre a sua caracterização molecular na América Latina, sobretudo no Brasil. O objetivo do presente estudo foi investigar os STs presentes em isolados fecais de indivíduos acompanhados no Hospital das Clínicas de São Paulo da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (HC/FMUSP). Para tanto, amostras fecais positivas para Blastocystis sp. diagnosticadas na Seção de Parasitologia do Laboratório Central (HC/FMUSP) foram utilizadas para o isolamento de DNA. A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi realizada utilizando iniciadores específicos para a subunidade 18S do DNA ribossomal de Blastocystis sp. A reação de sequenciamento dos produtos de PCR foi realizada, as sequências de DNA obtidas foram alinhadas e comparadas com outras sequências da base de dados GenBank e MLST. Foram identificados os STs (ST1, ST2, ST3 e ST6), sendo o ST3 o mais prevalente entre os isolados humanos seguido pelo ST1. Os alelos de número 34 e 36 foram os mais frequentes. Em conclusão, estes resultados contribuem para a caracterização molecular e a distribuição dos STs de Blastocystis sp. em amostras de fezes humanas no Brasil. / Blastocystis sp. is an organism described as enteroparasite protozoan, commonly found in stool samples from humans. Several subtypes have been described in humans, but pathogenic potential and aspects epidemiological are still controversial. The aim of the present study was to investigate Blastocystis subtypes (STs) from patients of Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (HC/FMUSP), Brazil. Blastocystis sp. positive stool samples diagnosed in Section of Parasitology of Central Laboratory (HC/FMUSP) were used for DNA isolation. Polymerase chain reaction (PCR) was performed using specific primers targeting the small subunit of rRNA gene. Direct DNA sequencing of PCR products was performed, and the DNA sequences were aligned and compared to other sequences present in GenBank and MLST database. Four STs were identified (ST1, ST2, ST3 and ST6), where the ST3 was the most prevalent ST among human isolates followed by ST1. Allele nos. 34 and 36 were the most frequent. Another important finding is the presence of ST6, rarely detected in human isolates. In conclusion, our results contribute to the molecular characterization and distribution of Blastocystis sp. STs in human stool specimens in Brazil.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:usp.br/oai:teses.usp.br:tde-08022017-071309 |
| Date | 07 December 2016 |
| Creators | Melo, Gessica Baptista de |
| Contributors | Gryschek, Ronaldo Cesar Borges |
| Publisher | Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP |
| Source Sets | Universidade de São Paulo |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | Dissertação de Mestrado |
| Format | application/pdf |
| Rights | Liberar o conteúdo para acesso público. |
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