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Dissertação Brysa Mariana Dias Silveira_PMBqBM-UFBA.pdf: 10348506 bytes, checksum: 834113d4760fa2ead263f8a996b57e9c (MD5) / FAPESB / O transplante de ilhotas pancreáticas é uma alternativa promissora no tratamento do
Diabetes Tipo 1. Entretanto, após o isolamento há perda de uma massa considerável
da amostra, prejudicando o sucesso do transplante. O co-cultivo de células tronco
mesenquimais , com ilhotas pancreáticas contribui para a melhoria da qualidade do
enxerto. O objetivo do trabalho foi a avaliação in vitro do potencial angiogênico do
meio condicionado (MC)de células tronco mesenquimais de tecido adiposo (CTMAD),
por meio da revascularização e aumento da viabilidade das ilhotas pancreáticas.
As células obtidas de 8 amostras de lipoaspirado foram caracterizadas (citometria de
fluxo) e testadas quanto ao potencial multilinhagem. Para avaliação do potencial
angiogênico , coletou-se MC em normóxia e hipóxia. Utilizou-se modelo com HUVEC
para ensaio de migração e proliferação celular e ilhotas de ratos para análise da
viabilidade intra ilhota. Análise proteômica foi realizada para avaliação da qualidade do
MC. Dados obtidos demonstraram que HUVEC cultivadas na presença dos MC
apresentaram aumento da capacidade proliferativa, migratória e redução do índice de
apoptose. O MC em normóxia demonstrou maior capacidade angiogênica (p<0.001) e
proliferativa (p<0.05) comparado ao MC em hipóxia. Ambos os MC estimularam a
migração celular (p<0.01) e induziram a expressão da proteína Akt fosforilada em
HUVEC. A presença de fatores de crescimento nos MC deu suporte aos efeitos
observados no estudo. Desta forma, pode-se concluir que os MCde CTM-AD
apresentam grande potencial para manutenção da integridade de ilhotas pancreáticas
recém isoladas, devido aos seus efeitos protetor e angiogênico. / The islet transplantation is a promising alternative in the treatment of Diabetes Type 1.
Nevertheless, after isolation there is loss of a part sample, hurting transplant sucess.
Co-cultivation of mesenchymal stem cells with pancreatic islets contributes to
improving the quality of the graft. The objective of this study was to evaluate in vitro
angiogenic potential CM from MSC-AT through revascularisation and increase the
viability of pancreatic islets. The cells obtained from 8 lipoaspirate samples were
characterized (flow cytometry) and tested for multilineage potential. To evaluate the
angiogenic potential, was collected CMs in normoxia and hypoxia. HUVEC model were
used to migration and proliferation cell assay and rat islets for analysis intra islet
viability. Proteomic analysis was performed to evaluate the CM quality. Results
obtained showed that HUVEC cultured with CMs exibith increased proliferative,
migratory capacity and reduced apoptosis index. CM in normoxia showed greater
angiogenic capacity (p <0.001) and proliferative (p <0.05) compared to the CM in
hypoxia. Both CM stimulated cell migration (p <0.01) and induced expression of the
phosphorylated Akt protein on HUVEC. The presence of growth factors in CM gave
support to the effects seen in this study. Thus, one can conclude that MSC-AT CM
have great potential for maintaining the integrity of freshly isolated pancreatic islets due
to its protective and angiogenic effects.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:192.168.11:11:ri/21769 |
| Date | 02 September 2016 |
| Creators | Silveira, Brysa Mariana Dias |
| Contributors | Fortuna, Vitor Antônio, Labriola, Letícia, Rossi, Maria Isabel Doria, Couto, Ricardo David |
| Publisher | Instituto de Ciências da Saúde, Departamento de Bioquímica e Biofísica, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Bioquímica e Biologia Molecular, PMBqBM, brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFBA, instname:Universidade Federal da Bahia, instacron:UFBA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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