<p>Spermatogenesen är i många organismer en av de mest dramatiska förvandlingar som en cell kan genomgå – en vanlig, rund, diploid cell omvandlas till en nålformad, haploid cell med ett tätt packat cellmaskineri. I bananfluga, <i>Drosophila melanogaster</i>, innebär denna process flera karaktäristiska stadier. Ett av dessa är det primära spermatocyt-stadiet, som infaller innan cellen påbörjar meios-delning. Stadiet karaktäriseras av en uppluckrad kromatinstruktur i cellens kärna och ovanligt höga transkriptions- och translationshastigheter, för att producera allt det mRNA och de proteiner som behövs senare under spermatidomvandlingen. Två av de proteiner som uttrycks i höga nivåer i primära spermatocyter är ThioredoxinT (TrxT) och Painting of fourth (POF).</p><p>Thioredoxiner är små proteiner som har som funktion att reducera disulfidbryggor i andra proteiner, en mekanism som används i många olika fysiologiska sammanhang. I denna avhandling visar jag att <i>TrxT</i>-genen kodar för ett testikelspecifikt thioredoxin som binder specifikt till Y-kromosom-loopar i primära spermatocyter. <i>TrxT</i>-genen ligger precis bredvid <i>deadhead</i> (<i>dhd</i>), en gen som kodar för ett hon-specifikt thioredoxin som är lokaliserat till cellkärnorna i flugans äggstockar. Ett tredje thioredoxin i <i>Drosophila</i> är det allmänt uttryckta Thioredoxin-2 (Trx-2). Jag har upptäckt att flugor som saknar Trx-2 är livsdugliga, men att de lever kortare än vildtypsflugor, medan flugor med extra mycket Trx-2 har en ökad tålighet mot oxidativ stress. Slående nog är en total avsaknad av alla tre thioredoxiner inte förenat med letalitet, tvärtemot vad man skulle kunnat vänta sig. Alla tre thioredoxiner finns i de olika <i>Drosophilider</i> som undersökts och den ovanliga genorganisation som delas av <i>TrxT</i> och <i>dhd</i> är generellt konserverad.</p><p>Gen-namnet <i>Painting of fourth</i> härstammar från upptäckten att POF binder till (”målar”) <i>Drosophilas</i> kromosom 4. Jag visar i min avhandling att POFs bindning till den fjärde kromosomen är bevarad i olika <i>Drosophila</i>-arter och att POF kolokaliserar med både ett protein och en histon-modifiering, som är förknippade med doskompensation, i arter där POF också binder till hanens X-kromosom. POF uttrycks överallt i både honor och hanar, men i väldigt höga nivåer i hanens testiklar. Jag visar här att POF finns i cellkärnan hos primära spermatocyter, men också i kärnan på mognande spermatider, och att avsaknad av POF in hanens könsceller orsakar en global nedreglering av gener som ligger på kromosom 4. Kombinationen av mina POF- resultat tyder på att POF har en viktig funktion i det första kända fallet av genreglering av en hel autosomal kromosom.</p> / <p>The process of spermatogenesis is in many organisms one of the most dramatic cellular transformations - a normal round diploid cell is ultimately transformed into a needle shaped haploid cell with tightly packaged cell machinery. In <i>Drosophila melanogaster</i> this process involves several characteristic stages, one of these being the primary spermato-cyte stage, which is the stage prior to meiosis. This stage is characterized by a loose chromatin structure in the nucleus and exceptionally high rates of transcription and translation to produce essentially all the mRNAs and proteins that are needed later during spermatid formation. Two proteins that are expressed in high levels in primary spermatocytes are ThioredoxinT (TrxT) and Painting of fourth (POF).</p><p>Thioredoxins are small thiol proteins that reduce disulfides in other proteins, a mechanism that is utilized in many different contexts. In this thesis I show that the <i>TrxT</i> gene encodes a testis-specific thioredoxin that specifically associates to Y-chromosome loops in primary spermatocytes. <i>TrxT</i> is located right next to <i>deadhead</i> (<i>dhd</i>), a gene that encodes a female-specific thioredoxin that specifically locates to nuclei in the ovaries. A third thioredoxin in <i>Drosophila</i> is the ubiquitously expressed Thioredoxin-2 (Trx-2). I have found that flies lacking Trx-2 are viable but have shorter life spans than wild type flies, while over-expression of Trx-2 mediates an increased resistance to oxidative stress. Interestingly, a lack of all three thioredoxins does not result in lethality, contrary to what could be expected. All three thioredoxins are conserved among <i>Drosophilids</i> and the striking genomic organization of <i>TrxT</i> and <i>dhd</i> is generally conserved.</p><p>The gene name <i>Painting of fourth</i> originates from the finding that POF stains the 4th chromosome of <i>Drosophila</i> in a banded pattern on salivary gland chromosomes. I show in this thesis that POF binding to the equivalent of the 4th chromosome is conserved in genus <i>Drosophila</i> and that POF co-localizes with both a protein and a histone modification associated with dosage compensation in species where POF also binds the male X. POF is expressed ubiquitously in both males and females, but at very high levels in male testes. I show that POF is present in nuclei of primary spermatocytes, but also in nuclei of maturing spermatids and that a lack of POF in the male germline causes a global down-regulation of chromosome 4 genes. These results combined suggest a function of POF in the first known case of chromosome-wide gene regulation of an autosome.</p>
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA/oai:DiVA.org:umu-1008 |
| Date | January 2007 |
| Creators | Svensson, Malin J. |
| Publisher | Umeå University, Umeå Centre for Molecular Pathogenesis (UCMP) (Faculty of Science and Technology), Umeå : Umeå centrum för molekylär patogenes (UCMP) (Teknisk-naturvetenskaplig fakultet) |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | Doctoral thesis, comprehensive summary, text |
Page generated in 0.003 seconds