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Caracteriza??o Fenot?pica da Resist?ncia aos Antimicrobianos e Detec??o do Gene mecA em Staphylococcus spp. coagulasenegativos Isolados de Amostras Animais e Humanas / Phenotypic Characterization of Antimicrobial Resistance and Detection of the mecA Gene in CoagulaseNegative Staphylococcus spp. Isolates of Animal and Human Samples

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Previous issue date: 2007-02-28 / Funda??o Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Coagulasenegative
staphylococci (SCN) take part of normal microbiota. Although it has been
considered saprophytic, nowadays there is a concern about its pathogenic
potential.Nevertheless, all advance in SCN identification assays, these microorganisms are
continually neglected in laboratorial routine of infectious diseases, because of the wide range of
species. In spite of the difficulties, it is necessary to make an appropriated species identification
in order to differentiate the potential pathogenic agents and to determine its antimicrobial
susceptibility pattern. Resistance in SCN is related to the presence of mecA gene, which
expresses a heterogeneous pattern that can be detected through diverse phenotypics tests. In this
study, 72 SCN isolates obtained from external ear conducts of dogs, bovine mastitis and human
nosocomial infections were evaluated. Staphylococcus xylosus was the most prevalent
microorganism in animal and S. cohnii subsp.urealyticus in human sample. The antimicrobial
resistance patterns were evaluated through disc diffusion test, and a high level of resistance to
penicillin and ampicillin were detected. The most efficient antibiotics evaluated were
gentamicin, vancomicin and the association ampicillin+sulbactam. Oxacillin resistance was
phenotypically detected by modified disc diffusion test, agar screen, broth microdilution and
agar dilution. Presence of mecA gene where detected in 5,55% of the isolates by Polimerase
Chain Reaction (PCR). Correlation with the detection of mecA gene was used as gold standard
for evaluation of sensitivity and specificity of phenotypical assays. The low number of mecA
positives isolates did not allowed the association between cefoxitin and oxacillin resistance as a
test to detect the presence this gene. The broth microdilution and agar dilution tests presented
the best accuracy in phenotypic detection of the oxacillin resistance. / Os estafilococos coagulasenegativos
(ECN) fazem parte da microbiota normal da pele e
apesar de terem sido considerados sapr?fitas por muito tempo, o seu significado cl?nico como
agente etiol?gico tem aumentado com o passar dos anos. No entanto, apesar de todo avan?o nas
t?cnicas de identifica??o dos ECN e do conhecimento destes como agentes etiol?gicos em
diversos processos infecciosos, estes microrganismos muitas vezes s?o negligenciados na rotina
laboratorial, devido a enorme diversidade de esp?cies encontradas. A identifica??o das esp?cies
de ECN, embora de dif?cil realiza??o para a maioria dos laborat?rios cl?nicos, ? necess?ria para
diferenciar o potencial patog?nico e o perfil de resist?ncia de cada isolado. A resist?ncia ?
oxacilina em ECN ? mediada pelo gene mecA e usualmente heterog?nea, sendo detectada por
v?rios m?todos fenot?picos. Neste estudo, foram avaliados 72 isolados de ECN provenientes de
amostras do conduto auditivo de c?es da ra?a Beagles, de mastite bovina e de infec??es
humanas. Staphylococcus xylosus foi o microrganismo mais isolado, nas amostras animais, e S.
cohnii subsp.urealyticus em humanos, dentro de uma ampla gama de esp?cies identificadas. O
perfil de resist?ncia aos antimicrobianos em isolados de animais e humanas foi avaliado atrav?s
da t?cnica de difus?o em disco, na qual detectouse
um elevado n?vel de resist?ncia ? penicilina
e ampicilina. A gentamicina, vancomicina e associa??o ampicilina+sulbactam foram eficientes
frente aos isolados testados. A avalia??o da resist?ncia ? oxacilina foi realizada atrav?s da
difus?o em disco modificada, ?gar screen, microdilui??o em caldo e em ?gar. A presen?a do
gene mecA foi determinada pelo m?todo da Rea??o em Cadeia de Polimerase (PCR), sendo
5,55% dos isolados mecA positivos. Os resultados fenot?picos de resist?ncia a cefoxitina e a
oxacilina foram correlacionados com a detec??o do gene mecA, que foi utilizado como padr?o
ouro para avalia??o da sensibilidade e especificidade das t?cnicas utilizadas. O reduzido n?mero
de isolados mecA + n?o permitiu estabelecer o grau de correla??o entre a cefoxitina e a
oxacilina como m?todo de predi??o do gene, embora ambas tenha apresentado o mesmo
percentual de resist?ncia. O teste fenot?pico que apresentou melhor acur?cia na detec??o da
resist?ncia ? oxacilina foi a microdilui??o em caldo.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:tede/855
Date28 February 2007
CreatorsSoares, Lidiane de Castro
ContributorsSouza, Miliane Moreira Soares de
PublisherUniversidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Programa de P?s-Gradua??o em Microbiologia Veterin?ria, UFRRJ, Brasil, Microbiologia Veterin?ria
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRRJ, instname:Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, instacron:UFRRJ
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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