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Criopreservação de tecido testicular de cães : avaliação histológica e ultraestrutural

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Previous issue date: 2016-02-25 / Canids are part of the large number of endangered species. The survival of these species depends on the conservation of existing biodiversity. The use of gamete preservation techniques associated with reproductive technologies such as artificial insemination (AI), in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) were developed to help propagate and preserve the genetic potential of canídeos.A testicular tissue cryopreservation might be a method used when ejaculate freezing techniques is not possible. This work set in two experimentos congelamento and vitrificaçãoin vitro, comparing different cryoprotectants (glycerol, dimetisufóxido (DMSO) and trehalose) in testicular tissue of domestic dogs (Canis familiaris). Fragments of 9 adult dogs testes were subjected to a cooling with 4 cryopreservation protocols: slow freezing with glycerol, dimethylsulfoxide (DMSO) or solid surface vitrification using glycerol or DMSO. Fragments of 3mm testicular parenchyma were separated into groups: control, subjected to slow freezing and vitrification. Histological evaluations of the fragments were performed before, after freezing and thawing by light and electron microscopy. Based on morphology and ultrastructure, the testicular tissue of slow freezing, there was no difference between the cryoprotectants. Among the vitrified groups, exposure to DMSO produced a greater structural integrity and architecture when compared to the glycerol group. Comparison of slow freezing and vitrification have shown that vitrification samples revealed more area consisting of tubular compartment, tubular lumen, seminiferous epithelium and conserved membrane. Furthermore, the intertubular compartment Leydig cells showed normal morphology and had characteristics typical of steroidogenic cells. From the results, it was concluded that vitrification DMSO is the most effective method for criopresevar testicular tissue of adult dogs, and can be used as a routine procedure. / Os canídeos fazem parte do grande número de espécies ameaçadas de extinção. A sobrevivência destas espécies depende da conservação da biodiversidade existente. O uso de técnicas de preservação de gametas associadas às tecnologias reprodutivas tais como, inseminação artificial (IA), fertilização in vitro (FIV) e injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) foram desenvolvidas para ajudar a propagar e preservar o potencial genético dos canídeos.A criopreservação de tecido testicular pode vir a ser um método utilizado quando técnicas de congelação do ejaculado não é possível. A presente dissertação configurou-se em dois experimentoscongelamento e vitrificaçãoin vitro, comparando diferentes crioprotetores (glicerol, dimetisufóxido (DMSO) e trealose) em tecido testicular de cães domésticos (Canis familiaris). Fragmentos de testículos de 9 cães adultos foram submetidos a um arrefecimento com 4 protocolos de criopreservação: congelamento lento com glicerol, dimetilsulfóxido (DMSO), ou vitrificação superfície sólida, utilizando glicerol ou DMSO. Os Fragmentos de 3mm do parênquima testicular foram separados em grupos: controle, submetido ao congelamento lento e vitrificação. As avaliações histológicas dos fragmentos foram realizadas antes, após congelação e descongelação por microscopia óptica e eletrônica. Com base na morfologia e ultraestrutura, o tecido testicular de congelação lenta, não houve diferença entre os crioprotetores. Entre os grupos vitrificados, a exposição ao DMSO produziu maior integridade da estrutura e arquitetura quando comparado ao grupo de glicerol. A comparação do congelamento lento e vitrificação demonstraram que a vitrificação revelou amostras com mais área composta por compartimento tubular, luz tubular, epitélio seminífero e membrana conservada. Além disso, o compartimento intertubular mostrou células de Leydig tinham morfologia normal e características típicas de células esteroidogênicas. Diante dos resultados concluiu-se que a vitrificação com DMSO é o método mais eficaz para criopresevar tecido testicular de cães adultos, podendo ser utilizado como procedimento de rotina.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede2/4805
Date25 February 2016
CreatorsCARVALHO, Maria da Conceição
ContributorsOLIVEIRA, Erika Christina Santos, SILVA JUNIOR, Valdemiro Amaro da, BATISTA, André Mariano, DONATO, Mariana Aragão Matos
PublisherUniversidade Federal Rural de Pernambuco, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal Tropical, UFRPE, Brasil, Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE, instname:Universidade Federal Rural de Pernambuco, instacron:UFRPE
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
Relation-6143187600765506511, 600, 600, 600, -8922364187987396204, 453670264235017319

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