Le cytochrome P450 3A4 hépatique humain (CYP3A4) est le cytochrome P450 le plus abondant. Celui-ci est impliqué dans la dégradation de plus de 50% des médicaments que nous absorbons. Les cytochromes P450 forment une grande famille d'enzymes, caractérisée par la présence d'un hème au site actif, que l'on retrouve chez tous les organismes vivants. La réaction générale catalysée par les cytochromes P450 est une réaction d'oxygénation de substrats qui consomme de l'oxygène et du NADPH. L'étude du CYP3A4 nous a permis de constater que le site actif de cette enzyme est très sensible à la pression et qu'il était essentiel de privilégier un mode de lyse des cellules exprimant le CYP3A4 aux ultra-sons. L'expression en grande quantité du polypeptide a été réussie par l'utilisation en combinaison du vecteur d'expression pET-30a et de la souche Escherichia coli C41 (DE3). Les premières études de spectroscopie de résonance Raman du CYP3A4 purifié nous ont permis d'assigner le mode de vibration VFe-co comme étant situé à 476 cm"1 . De plus les spectres de résonance Raman dans la région des basses fréquences n'ont démontré qu'un très léger déplacement du mode VFeco lors de l'ajout des substrats imipramine et nifédipine. Ce résultat est compatible avec le fait que le site actif du CYP3A4 est flexible et relativement grand de sorte que la molécule de CO liée à Thème n'est presque pas été affectée par l'ajout de ces substrats.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:LAVAL/oai:corpus.ulaval.ca:20.500.11794/18942 |
| Date | 12 April 2018 |
| Creators | Plante, Mélanie |
| Contributors | Couture, Manon |
| Source Sets | Université Laval |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | mémoire de maîtrise, COAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrise |
| Format | ix, 102 f., application/pdf |
| Rights | http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
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