Pluripotent cells are unique due to their developmental potential and the possibility to study them is the
key step to understand human development. These cells are characterized by their ability to originate
all the cellular lineages within an adult organism. Within embryonic milieu, pluripotent cells represent
a dynamic fraction of the total cell number. Moreover, their physiological existence is constrained to
early stages of embryonic development. In vitro culture of the different types of mammalian pluripotent
cells, and singularly embryonic stem cells (ESC), enables the characterization of the pluripotent state.
In the four articles included in this thesis we have addressed two different aspects of the molecular
characterization of mammalian pluripotent cells. First, we investigated the establishment of the
trophectoderm and the inner cell mass in the embryo measuring transcript abundance and protein
presence of the transcription factors known to play a role in the earliest cellular differentiation process.
In addition we have evaluated of genomic stability of human ESC lines during long-term culture,
observing the accumulation of sukaryotypic aberrations such as loss of heterozygosity that affect loci
comprising genes involved in genomic stability maintenance. We also checked the genomic status of
two human ESC lines derived from embryos that had been diagnosed as abnormal after genetic
preimplantation diagnosis (PGD). The molecular analysis of these cells ruled out the hypothesized
self-correction of the aneuploidies between the PGD and the establishment of the cell lines. / Les cèl·lules pluripotents són úniques atesa la seva plasticitat durant el desenvolupament i la
possibilitat d'estudiar-les és un pas essencial per poder comprendre el desenvolupament embrionari.
Aquestes cèl·lules es caracteritzen per la seva habilitat per donar lloc a tots els llinatges cel·lulars de
l'organisme. Dins de l'embrió, les cèl·lules pluripotents representen una fracció dinàmica del nombre
total de cèl·lules i la seva existència fisiològica està constreta a els estadis més primerencs del
desenvolupament embrionari. El cultiu in vitro dels diferents tipus de cèl·lules pluripotents en
mamífers, i en especial les cèl·lules mare embrionàries, permet la caracterització d'aquest estat
cel·lular.
En els quatre capítols inclosos en aquesta tesi, hem tractat dos aspectes diferents de la caracterització
molecular de les cèl·lules pluripotents. Primer, hem investigat l'establiment del trofectoderm i de la
massa cel·lular interna en l'embrió mesurant l'abundància dels trànscrits i la presència de proteina dels
factors de transcripció implicats en el primer process de diferenciació cel·lular conegut. A més, hem
avaluat l'estabilitat genòmica de dues línies de cèl·lules mare en cultiu durant més de 40 passis. Com a
resultat, hem observat l'acumulació de aberracions genòmiques a nivell subcariotípic, en especial
pèrdua d'heterozigositat que afecta a locus que contenen gens implicats en el manteniment de
l'estabilitat genòmica. També hem comprovat l'estatus genòmic de dos linies de cèl·lules mare
embrionàries humanes derivades a partir d'embrions trobats aneuploids per un diagnòstic genètic
preimplantacional. L'anàlisi molecular d'aquestes cèl·lules va descartar la hipòtesi d'una autocorrecció
de les aneuploidies detectades entre el diagnòstic preimplantacional i la derivació de les línies a partir
d'aquests embrions.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:TDX_UPF/oai:www.tdx.cat:10803/31902 |
| Date | 22 November 2010 |
| Creators | Pareja Gómez, Josep |
| Contributors | Zaninovic, Nikica, Veiga, Anna, Universitat Pompeu Fabra. Departament de Ciències Experimentals i de la Salut |
| Publisher | Universitat Pompeu Fabra |
| Source Sets | Universitat Pompeu Fabra |
| Language | English |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis, info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| Format | 228 p., application/pdf |
| Source | TDX (Tesis Doctorals en Xarxa) |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess, ADVERTIMENT. L'accés als continguts d'aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d'investigació i docència en els termes establerts a l'art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l'autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s'autoritza la seva reproducció o altres formes d'explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d'un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s'autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs. |
Page generated in 0.0075 seconds