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Previous issue date: 2012-12-21 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The cortical development requires a precise process of proliferation, migration, survival and differentiation of newly formed neurons to finally achieve the development of a functional network. Different kinases, such as PKA, CaMKII, MAPK and PI3K, phosphorylate the transcription factors CREB, and thus activate it, inducing CREB-dependent gene expression. In order to identify the involvement of such signaling pathways mediated by CREB over neuronal differentiation and survival, in vitro experiments of cell culture were conducted using pharmacological kinase inhibitors and genetic techniques to express different forms of CREB (A-CREB and CREB-FY) in cortical neurons. Inhibition of PKA and CaMKII decreased the length of neuronal processes (neurites); whereas inhibition of MAPK did not affect the length, but increased the number of neurites. Blockade of PI3K do not appear to alter neuronal morphology, nor the soma size changed with the kinase blockades. CREB activation (CREB-FY) along with MAPK and PI3K blockades presented a negative side effect over neuritic growth and the expression of A-CREB leaded to a significant decrease in neuronal survival after 60h in vitro and mimicked some of the effects on neuronal morphology observed with PKA and CaMKII blockade. In summary the signaling through CREB influences the morphology of cortical neurons, particularly when phosphorylated by PKA, and CREB signaling is also important for survival of immature neurons prior to the establishment of fully functional synaptic contacts. Our data contribute to understanding the role of CREB signaling, activated by different routes, on survival and neuronal differentiation and may be valuable in the development of regenerative strategies in different neurological diseases / O desenvolvimento cortical requer um minucioso processo de prolifera??o, migra??o, sobreviv?ncia e diferencia??o celular para que se possa alcan?ar a elabora??o de uma rede neuronal funcional. Diferentes kinases, tais quais a PKA, CaMKII, MAPK e PI3K, fosforilam o fator de transcri??o CREB, ativando-o, e induzindo em ultima inst?ncia a express?o de genes CREB-dependentes. A fim de identificar o envolvimento de tais vias de sinaliza??o mediadas por CREB sobre a diferencia??o e sobreviv?ncia neuronal, experimentos in vitro de cultura celular foram conduzidos fazendo-se uso de f?rmacos bloqueadores das kinases e de t?cnicas gen?ticas para expressar diferentes formas do CREB (A-CREB e CREB-FY) em neur?nios corticais. A inibi??o da PKA e da CAMKII diminuiu o comprimento dos neuritos; enquanto a inibi??o da MAPK n?o afetou o comprimento, mas aumentou o numero de neuritos. O bloqueio da PI3K n?o pareceu alterar a morfologia neuronal, nem o tamanho do soma foi afetado pelo bloqueio dessas kinases. A ativa??o de CREB (CREB-FY) na presen?a de bloqueadores da MAPK e PI3K teve um efeito negativo sobre o crescimento neur?tico e a express?o do A-CREB provocou uma redu??o significativa da sobreviv?ncia neuronal a partir de 60h in vitro e revelou similaridades quanto ? morfologia neuronal observadas com o bloqueio da PKA e CaMKII. Em suma, a sinaliza??o mediada por CREB influi na morfologia de neur?nios corticais, principalmente quando fosforilado pela PKA, e o bloqueio da sinaliza??o via CREB interfere na sobreviv?ncia neuronal mesmo antes do aparecimento de atividade sin?ptica. Nossos resultados contribuem para o entendimento da sinaliza??o por CREB, ativado por diferentes vias, sobre a sobreviv?ncia e diferencia??o neuronal, podendo ser de grande valia na elabora??o de estrat?gias regenerativas em diferentes doen?as neurol?gicas
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/17025 |
| Date | 21 December 2012 |
| Creators | Santana, Themis Taynah da Silva |
| Contributors | CPF:05278916737, http://lattes.cnpq.br/6118493598074445, Matta, Luciana Duarte Martins da, CPF:91032350415, http://lattes.cnpq.br/2752887804614967, Menezes, Jo?o Ricardo Lacerda de, CPF:91198909749, http://lattes.cnpq.br/7876543662888424, Costa, Marcos Romualdo |
| Publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Programa de P?s-Gradua??o em Neurociencias, UFRN, BR, Neurobiologia Celular e Molecular; Neurobiologia de Sistemas e Cogni??o; Neurocomputa??o Neuroengen |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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