Orientadores: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes, Caio Cezar Randi Ferraz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-27T00:47:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015 / Resumo: O conhecimento da comunidade microbiana e do seu potencial antigênico é importante para o entendimento da patogênese da periodontite apical em dentes endodonticamente tratados. Os objetivos do presente estudo foram: 1) Caracterizar a microbiota associada ao insucesso endodôntico através do teste bioquímico, Nested PCR e sequenciamento parcial do gene 16S rRNA; 2) Quantificar endotoxinas (LPS) por meio do teste Limulus Amebocyte Lysate (LAL) e citocinas pró-inflamatórias IL-1?, IL-1?, TNF-? e PGE2 através do ensaio imunoenzimático (ELISA), correlacionando-as com aspectos clínicos e radiográficos dos pacientes; 3) Avaliar o efeito do preparo químico-mecânico (PQM) e medicação intracanal (MIC) na redução de microrganismos, LPS e de citocinas pró-inflamatórias. Foram coletadas amostras do conteúdo endodôntico de 20 dentes unirradiculares antes (C1), após o PQM (C2), após o uso de EDTA 17% (C3) agitado com ultrassom, e após a MIC (C4). Utilizaram-se materiais estéreis e/ou apirogênicos e técnicas assépticas durante as coletas. Após o processamento laboratorial das amostras, os dados foram tabulados e analisados pelos testes estatísticos Qui-quadrado, Correlação de Spearman e ANOVA (Tukey-Kramer). Os resultados apontaram a presença de uma microbiota mista contendo bactérias Gram positivas e Gram negativas. Quatro diferentes filos foram identificados: Actinobacteria, Firmicutes, Fusobacteria e Proteobacteria. Enterococcus faecalis foi a espécie mais prevalente, identificada fenotipicamente (19/158) e genotipicamente (42/158). O sequenciamento conseguiu identificar 10,12% das amostras em nível de gênero e 89,88% em nível de espécie, enquanto que o teste bioquímico identificou 13,29% e 51,26%, respectivamente. As bactérias mais prevalentes identificadas por Nested PCR foram: Enterococcus faecalis (97,5%), seguido de Porphyromonas gingivalis (88,75%), Fusobacterium nucleatum (56,25%) e Aggregatibacter actinomycetemcomitans (37,5%). O PQM reduziu bactérias em 96,69% (p<0,05), com percentual de redução para Clorexidina (CLX) 2% gel em 99,3% e para NaOCl 6% em 92,1% (p>0,05). O EDTA 17% somente mostrou efeito complementar na redução bacteriana no grupo do NaOCl 6% (p<0,05). Apenas a CLX 2% gel foi efetiva na redução de endotoxinas comparado ao NaOCl 6% e EDTA 17% (P<0,05). O PQM, independentemente da substância química utilizada, foi efetivo na redução dos níveis das citocinas pró-inflamatórias Il-1? (88,14%), Il-1? (89,33%), TNF-? (89,85%) e PGE2 (48,60%) (p<0,05). A MIC não mostrou efeito aditivo na redução de bactérias e citocinas pró-inflamatórias em ambos os grupos (p<0,05); e somente apresentou ação sobre LPS no grupo Ca(OH)2 + CLX 2% gel (p<0,05). Houve correlação positiva ente bactérias, LPS, citocinas pró-inflamatórias e os aspectos clínicos e radiográficos dos pacientes (P<0,05). Conclui-se que o PQM apresentou efeito significante na redução do conteúdo infeccioso de canais radiculares de dentes com insucesso do tratamento endodôntico, enquanto que a MIC não mostrou efeito aditivo significante na redução desses níveis / Abstract: The knowledge of the microbial community and its antigenic potential is important for understanding the pathogenesis of apical periodontitis in endodontically treated teeth. The objectives of this study were: 1) Characterize the microbiota associated to endodontic failure through the biochemical test, Nested PCR and partial sequencing of gene 16S rRNA.; 2) Quantify endotoxin (LPS) by Limulus Amebocyte Lysate test and pro-inflammatory cytokines IL-1?, IL-1?, TNF-? and PGE2 by enzyme-linked immunosorbent assay, correlating them with the patients' clinical and radiographic features; 3) To evaluate the effect of chemo-mechanical preparation (CMP) and intracanal medications (ICM) in reducing microorganisms, LPS and pro-inflammatory cytokines. Samples of endodontic content of 20 single-rooted teeth were collected before (C1), after CMP (C2), after the use of 17% EDTA (C3) agitated with ultrasound, and after ICM (C4). Sterile/apyrogenic materials and a aseptic techniques were used during the samples' collection. After processing the samples, the data were tabulated and analyzed by statistical testes Chi-square, Spearman correlation, and analysis of variance (Tukey-Kramer). The results indicated the presence of a mixed microbiota presenting Gram positive and Gram negative bacteria. Four different phyla were identified: Actinobacteria, Firmicutes, Proteobacteria and Fusobacterium. Enterococcus faecalis was the most prevalent species, identified phenotypically (19/158) and genotypically (42/158). Sequencing was able to identify 10.12% of the samples at the genus level and 89.88% at the species level, whereas the biochemical test identified 13.29% and 51.26%, respectively. The most prevalent bacteria by Nested PCR were: Enterococcus faecalis (97.5%), followed by Porphyromonas gingivalis (88.75%), Fusobacterium nucleatum (56.25%) and Aggregatibacter actinomycetemcomitans (37.5%). CMP reduced bacteria in 96.69% (p<0.05), with a percentage reduction in 99.3% for 2% CLX gel and in 92.1% for 6% NaOCl (p>0.05). EDTA 17% showed only a further effect on bacterial reduction in the 6% NaOCl group (p<0.05). Only 2% CLX gel was effective in reducing endotoxin compared to 6% NaOCl and 17% EDTA (p<0.05). CMP regardless of chemical substance used, was effective in reducing the levels of pro-inflammatory cytokines IL-1? (88.14%), IL-1? (89.33%), TNF-? (89.85%) and PGE2 (48.60%) (p<0.05).The intracanal medication not show additive effect in reducing bacteria and proinflammatory cytokines in both groups (p<0.05); and only presented action against LPS in the Ca(OH)2 + 2% CLX gel group (p<0.05). There was a positive correlation between bacteria, LPS, pro-inflammatory cytokines and clinical and radiographic features (p<0.05). In conclusion, CMP presented a significant effect in reducing the infectious content of root canal of teeth with endodontic failure, while ICM showed no significant additive effect in reducing these levels / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/290461 |
| Date | 02 June 2015 |
| Creators | Barbosa-Ribeiro, Marlos 1986- |
| Contributors | UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Ferraz, Caio Cezar Randi, 1973-, Gomes, Brenda Paula Figueiredo de Almeida, Carvalho, Fabíola Bastos de, Záia, Alexandre Augusto |
| Publisher | [s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Programa de Pós-Graduação em Clínica Odontológica |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 173 p. : il., application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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