Orientadora: Maysa Furlan / Coorientador: Ana Maria Soares Pereira / Banca: Angela Regina Araújo / Banca: Rafael Victorio Carvalho Guido / Banca: Mario Sergio Palma / Banca: Fernando Continguiba da Silva / Resumo: Plantas biossintetizam uma ampla variedade de metabólitos secundários cujas atividades farmacológicas são consolidadas. No entanto, a obtenção em escala de metabólitos secundários a partir de plantas, muitas vezes, é restringida pelo acúmulo minoritário desses compostos em seus tecidos. Como muitas dessas moléculas apresentam elevada complexidade estrutural, sua obtenção por síntese orgânica pode ser ainda mais dificultada, tanto do ponto de vista econômico quanto ecológico. Contudo, as elucidações das vias metabólicas utilizadas pelas plantas na biossíntese dessas moléculas, sobretudo do ponto de vista enzimático, podem subsidiar o desenvolvimento de ferramentas biotecnológicas, como a engenharia metabólica, para enfrentar esses desafios. Nesse contexto, surge a espécie Maytenus ilicifolia (Celastraceae), uma planta medicinal conhecida por produzir uma gama de metabólitos secundários bioativos, em especial, os triterpenos quinonametídeos (TQs), moléculas com pronunciada e abrangente atividade antitumoral. Desta forma, no presente trabalho foi realizado um estudo proteômico de células de M. ilicifolia com o objetivo principal de inventariar as enzimas de suas vias metabólicas secundárias, principalmente relacionadas a biossíntese dos TQs. Para isso, culturas de células de M. ilicifolia produtoras de TQs, maitenina (1) e 22-β-hidroximaitenina (2), foram elicitadas com metil jasmonato (100 µM) por 12, 24, 48 e 96 h e monitoradas quanto a produção dos TQs por CLAE-DAD. Das célul... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Plants biosynthesize a wide variety of secondary metabolites with consolidated pharmacological activities. However, the large - scale production of secondary metabolites by plants is often restricted by minor accumulation of these compounds in their tissues. Many of these molecules shows high structural complexity so their obtainment by organic synthesis can be further complicated both economically and ecologically. However, the elucidation of metabolic pathways used by plants in the biosynthesis of these mol ecules, especially from the enzymatic point of view, can support the development of biotechnological tools such as metabolic engineering, to address these challenges. In this context, emphasis can be given to Maytenus ilicifolia species (Celastraceae), a m edicinal plant that produces a range of bioactive compounds, including quinonamethide triterpenes (QMTs). Thus, in this study we performed a proteomic study of M. ilicifolia cells with the primary goal to provide an enzyme inventory of their secondary meta bolic pathways, mainly for biosynthesis of QMTs. Based on it, M. ilicifolia cell cultures producing the QMTs maytenin ( 1 ) and 22 - β - hydroxymaytenin ( 2 ) were elicited with methyl jasmonate (100 μM) during 12, 24, 48 and 96 h and monitoring for QMTs productio n by HPLC - DAD. Cells that showed a higher QMTs accumulation (when comparing elicited and control cells.) were submitted to protein extractions and analyzed by LCMS - IT - TOF, using shotgun strategy. We have found 1319 proteins in both cells by comparison with proteins of the model plants from databases. Among them, enzymes involved in the biosynthesis of QMTs, including the cytochrome P450 (CYP450s) that potentially catalyze the final steps of this synthesis. We also have found enzymes involved in the biosynth esis of others secondary metabolites characteristic of the species, and proteins related to primary... / Doutor
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UNESP/oai:www.athena.biblioteca.unesp.br:UEP01-000875127 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Paz, Tiago Antunes. |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Instituto de Química. |
| Publisher | Araraquara, |
| Source Sets | Universidade Estadual Paulista |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | text |
| Format | 295 f. : |
| Relation | Sistema requerido: Adobe Acrobat Reader |
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