CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O cloridrato de benzidamina (BEN) trata-se um anti-inflamatÃrio nÃo esteroidal comercialmente vendido em muitos paÃses e que tem propriedades anestÃsicas locais e para o alÃvio da dor. Altas doses de BEN administradas de forma aguda podem causar efeitos psicoestimulantes. O objetivo do presente estudo foi Investigar os efeitos psicoestimulantes em camundongos e citotÃxicos em cultura de astrÃcitos do BEN.Para os testes comportamentais (campo aberto, inibiÃÃo prÃ-pulso, labirinto em Y, reconhecimento de objetos, interaÃÃo social e rota rod) e para a dosagem de monoaminas, foram utilizados um protocolo de tratamento agudo e um de dose repetida por sete dias com as doses de 50, 100 e 200 mg/kg do BEN por via oral. Para a dosagem de BDNF, utilizou-se apenas o protocolo de administraÃÃo de dose repetida. O estudo de citotoxicidade iniciou-se com o teste do MTT, onde foi realizado um screening de doses, sendo utilizadas as doses: 3,1; 6,2; 12,5; 25; 50 e 100 Âg/mL por um perÃodo de incubaÃÃo de 12 ou 24 horas. A anÃlise por citometria para a investigaÃÃo do tipo de morte celular envolvido com a citotoxicidade do BEN utilizou as doses de IC50, IC50x2 e IC50/2 do perÃodo de incubaÃÃo de 24h. Para as imunofluorescÃncias, usou-se a dose de IC50 do perÃodo de incubaÃÃo de 24h. Nossos resultados mostraram que BEN causou aumento da atividade locomotora, dÃficit no filtro sensÃrio-motor, diminuiÃÃo de cogniÃÃo e isolamento social em ambos os perÃodos de tratamento, sendo esses resultados semelhantes a outras drogas de abuso. A droga em estudo tambÃm causou alteraÃÃes nas monoaminas, com aumento da taxa de metabolizaÃÃo da dopamina e depleÃÃo dos nÃveis de serotonina no tratamento agudo e aumento da taxa de metabolizaÃÃo da dopamina e aumento dos nÃveis de serotonina no tratamento de dose repetida. BEN tambÃm causou diminuiÃÃo dos nÃveis de BDNF em corpo estriado. Os experimentos in vitro mostraram que BEN causou diminuiÃÃo da viabiliadade celular no teste do MTT, sendo essa citotoxicidade causada pela ativaÃÃo da via apoptÃtica verificada pela citometria de fluxo. AtravÃs de imunofluorescÃncia, pÃde-se confirmar que a via apoptÃtica envolvida com a citotoxicidade de BEN Ã a extrÃnseca, pois houve aumento da expressÃo da enzima caspase-8 e do Fator de TranscriÃÃo NFκB p65, enquanto que a enzima caspase-9, ativada pela via intrÃseca da apoptose, nÃo apresentou diferenÃa de expressÃo significativa em relaÃÃo ao grupo controle. Esse trabalho mostrou que BEN, assim como outras drogas de abuso, possui efeitos deletÃrios no Sistema Nervoso Central (SNC) vistos atravÃs dos testes comportamentais, sendo esses efeitos causados por alteraÃÃes de monoaminas e BDNF e ativaÃÃo da via extrÃnseca da apoptose em astrÃcitos. / Benzydamine hydrochloride (BEN) is a non-steroidal anti-inflammatory commercially sold in many countries that has local anesthetic and relief pain properties. Acute high doses of BEN can cause psychostimulants effects. The aim of this study was to investigate the psychostimulant effects in mice and the cytotoxic effect in astrocyte cultures.For the behavioral tests (open field, pre-pulse inhibition, Y-maze, object recognition, social interaction and rota rod) and for the monoamines assay, it was used an acute treatment protocol and a repeated dose for seven days protocol with BEM doses of 50, 100 and 200 mg/kg orally. For BDNF measure, we used only the repeated dose administration protocol. The cytotoxicity study began with the MTT test, which was performed a screening of doses (3.1; 6.2; 12.5; 25; 50 and 100 ug/ml) for a period of 12 or 24 hour of incubation. The cytometric analysis, used to investigate the type of cell death involved in the cytotoxicity of BEN, used the doses of IC50, IC50x2 and IC50/2 of the 24h incubation period. For immunofluorescence, it was used the IC50 dose of the 24h incubation period. Our results showed that BEN causes increased locomotor activity, deficit in sensorimotor filter, decreased cognition and social isolation in both periods of treatment, and these results are similar to other abuse drugs. The study drug also caused changes in monoamines, with increased dopamine metabolism rate and depletion of serotonin levels in the acute treatment and increased dopamine metabolism rate and increased serotonin levels in the repeated dose treatment. BEN also caused decreased BDNF levels in the striatum. In vitro experiments showed that BEN caused a decrease in cell viability in the MTT test, and this cytotoxicity in because of the activation of the apoptotic pathway verified by flow cytometry. By immunofluorescence, it was possible to confirm that the apoptotic pathway involved in BEN cytotoxicity is the extrinsic one, because there was an increase in the caspase-8 enzyme expression and in the NFκB p65 transcription factor, whereas the caspase-9 enzyme, activated by intrinsic apoptosis pathway, there was no significant difference when compared to control group. In summary, this study showed that BEN, as well as other abuse drugs, has deleterious effects on the Central Nervous System (CNS) seen through the behavioral tests, and these effects are caused by changes in monoamines and BDNF levels and activation of the extrinsic apoptotic pathway in astrocytes cells.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:11752 |
| Date | 29 August 2016 |
| Creators | Mariana Lima Feitosa |
| Contributors | Francisca ClÃa FlorenÃo de Sousa, Carla Thiciane Vasconcelos de Melo, Lissiana Magna Vasconcelos Aguiar, Daniel Freire de Sousa, Emiliano Ricardo Vasconcelos Rios |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Farmacologia, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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