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Previous issue date: 2004 / Lectinas são proteínas que se ligam reversivelmente e especificamente a carboidratos.
Caesalpinia ferrea é uma planta com ampla distribuição no Brasil, sendo utilizada em
medicina popular. Este trabalho teve como objetivo a purificação e caracterização de lectina
da vagem de Caesalpinia ferrea (CfePL). Extrato da vagem (E) em NaCl 0,15 M foi
submetido a purificação parcial com carvão ativado seguido de precipitação com sulfato de
amônio (0 80%, F80). A Atividade hemaglutinante (AH) de E e F80 foram avaliadas
usando diferentes eritrócitos. F80 foi cromatografada em coluna de quitina e lavada com
NaCl 0,15 M, seguido de NaCl 1M; CfePL foi eluída com ácido acético 1 M (pH 4,0). AH
de CfePL foi avaliada em presença de soluções de íons (Ca2+ e Mg2+), diferentes valores de
pH (2 12), por carboidratos, glicoproteínas e tratamento com diferentes temperaturas (30°
100°C, 30 min). A massa molecular da proteína nativa foi determinada pelo sistema
ÄKTAFPLC usando a coluna Sephacryl S-300; Preparações de CfePL foram avaliadas por
PAGE para proteínas nativas ácidas e básicas, bem como, em condições desnaturantes e
redutoras. Atividade antimicrobiana de CfePL foi avaliada com amostras de bactérias Grampositivas
(5) e Gram-negativas (3) ou fungo (4). CfePL não apresentou especificidade para
eritrócitos humanos, eritrócitos de coelho (512-1) foram escolhidos para avaliação de AH. AH
de CfePL foi estimulada por íons (65536-1) e diferentes valores de pH, a melhor AH (2048-1)
foi obtida com tampão citrato-fosfato (pH 4,5, 5,0, 5,5) e fosfato de sódio (pH 7,5), sendo
quase totalmente abolida em pH 9,0 (2-1). CfePL continuou ativa após aquecimento à 100°C,
foi parcialmente inibida pelos carboidratos (manose, frutose, N-acetilglicosamina, trealose,
raminose, sacarose, galactose, fucose) e ovoalbumina, caseína, fetuína e glicoproteínas de
soro de coelho, humano e fetal bovino. CfePL, uma proteína básica, apresentou uma banda
principal por SDS-PAGE. Sistema ÄKTAFPLC revelou dois picos protéicos com 43 e 31
kDa. CfePL (1,5μg) inibiu o crescimento dos microrganismos testados; os melhores
resultados (halo, 17 mm) foram com Escherichia coli e Colletotrichum gloesporioides e
apresentou uma concentração mínima inibitória (CMI) de 10μg/ml frente a estes dois
microrganismos. CfePL, purificada em quantidades de miligramas, foi um poderoso agente
antimicrobiano de baixo custo, com amplo espectro de ação
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/2066 |
| Date | January 2004 |
| Creators | XIMENES, Neila Caroline de Araújo |
| Contributors | COELHO, Luana Cassandra Breitenbach Barroso |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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