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Previous issue date: 2010 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso da L-arginina nos processos de
capacitação espermática e fecundação in vitro (FIV), analisando sua influência no
desenvolvimento embrionário, utilizando o sêmen de dois touros (Bos taurus e Bos
indicus). No experimento 1, os espermatozóides foram incubados, sem a presença
de oócitos, durante 0, 1, 2 e 3 h em meio de FIV adicionado de 0, 1, 10 e 50 mM de
L-arginina, sendo analisada a taxa de reação acrossômica. No experimento 2,
espermatozóides e oócitos foram incubados em meio de FIV acrescido com as
concentrações de L-arginina citadas anteriormente, durante aproximadamente 30 h.
Os oócitos bovinos foram maturados in vitro (MIV) e o subsequente cultivo
embrionário (CIV) foi realizado sobre monocamada de células da granulosa, em
meio SOF, sendo avaliadas as taxas de fecundação (18 hpi), clivagem e blastocisto
(2º e 7º dia de cultivo, respectivamente). A dosagem de NO3-/NO2- produzido durante
a FIV foi realizada através do método colorimétrico de Griess. Para análise
estatística dos dados, foi utilizado a ANOVA, com nível de significância de 5%. A Larginina
(1 mM), quando adicionada ao meio de capacitação espermática, durante
duas horas, aumentou a taxa de reação acrossômica em relação ao controle
(31,1±2,78 vs 23,4±2,65) em Bos taurus. A adição de L-arginina (50 mM) ao meio de
FIV (experimento 2), tanto em Bos taurus quanto em Bos indicus, diminuiu as taxas
de clivagem (78,7±2,17 vs 65,7±9,32; 72,7±3,36 vs 45±7,12; respectivamente) e
blastocisto (39,4±3,78 vs 15,2±6,12; 39,4±4,39 vs 16±8,54; respectivamente) em
relação ao controle. Sendo assim, observou-se que a L-arginina aumentou a taxa de
reação acrossômica em Bos taurus, porém reduziu as taxas de clivagem e
blastocistos em ambos os touros, sem influenciar na qualidade do embrião. / The aim of this work was to evaluate the use of the L-arginine in sperm capacitation
and in vitro fertilization (IVF), analyzing its influence on the embryonic development,
using semen from two bulls (Bos taurus and Bos indicus). In experiment 1, the
spermatozoa had been incubated without oocytes, during 0, 1, 2 and 3 hour in IVF
medium added of 0, 1, 10 and 50 mM L-arginine. In experiment 2, spermatozoa and
oocytes had been incubated in IVF medium added with the L-arginine concentrations
previously cited, during approximately 30 hour. The bovine oocytes had been
matured in vitro (IVM) and embryonic culture (IVC) was supported by a monolayer of
granulosa cells in SOF medium. It was evaluated fertilization (18 hpi), clivage and
blastocyst rates (2º and 7º culture day, respectively). The Griess colorimetric method
was applied to mensurement of the NO3 -/NO2 - produced during the IVF. For statistics
analysis, values were considered significantly different if P<0.05 following the
ANOVA test. The results had shown that L-arginine (1 mM), when added during
sperm capacitation for two hours, increased the acrosome reaction rate as compared
to Bos taurus control group (31,1±2,78 versus 23,4±2,65). The addition of L-arginine
(50 mM) to IVF medium (experiment 2), in both Bos taurus and Bos indicus
spermatozoa, decreased clivage rate (78,7±2,17 versus 65,7±9,32; 72,7±3,36 versus
45±7,12; respectively) and blastocyst rate (39,4±3,78 versus 15,2±6,12; 39,4±4,39
versus 16±8,54; respectively) as compared to control group. These results provide
that L-arginine increased the acrosome reaction rate in Bos taurus, however reduced
the clivage and blastocyst rates in both the bulls, but had not influenced the embryo
quality.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpa.br:2011/5545 |
| Date | January 2010 |
| Creators | SILVA, Thiago Velasco Guimarães |
| Contributors | OHASHI, Otávio Mitio |
| Publisher | Universidade Federal do Pará, Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, Universidade Federal Rural da Amazônia, Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, UFPA, EMBRAPA, UFRA, Brasil, Campus Universitário de Castanhal |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPA, instname:Universidade Federal do Pará, instacron:UFPA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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