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Análisis Funcional y Estructural del Promotor del Gen CBF-1 de Eucalyptus Globulus en la Respuesta a Estrés por Frío

En Chile, Eucalyptus globulus es una de las especies forestales de mayor importancia, debido
a su rápido crecimiento y a la calidad de su madera. Estas características hacen que sea una especie de
alto rendimiento y de principal interés para la industria de la celulosa. Sin embargo, la especie resulta
extremadamente sensible a las bajas temperaturas, por lo que ocurren grandes pérdidas en plantaciones
jóvenes de Eucalyptus globulus. En este contexto, la biotecnología forestal se perfila como una
herramienta eficaz para comprender y proponer soluciones a éste y a otros problemas.
En el plano de la investigación científica, se han realizado importantes avances en la
determinación de los mecanismos moleculares involucrados en la respuesta a estrés por frío en
Eucalyptus globulus. Entre ellos, el aislamiento y secuenciación de una serie de genes involucrados en
este proceso, como el gen EgCBF-1. Este gen codifica para un factor de transcripción que es activado
por frío y que es capaz de activar numerosos genes de respuesta a estrés abiótico.
En esta tesis se realizó un análisis estratégico que incluyó un recuento del panorama actual de
la industria forestal chilena y los principales avances biotecnológicos atingentes. A través del análisis
de la cadena de valor, se propuso un plan de negocios para la introducción de una variedad de
Eucalyptus globulus tolerante a las bajas temperaturas en la industria forestal chilena. Se determinó
que las principales ventajas para el desarrollo de este proyecto son las políticas gubernamentales
favorables que incentivan el desarrollo biotecnológico del sector forestal y la consistencia de la
industria forestal chilena. Se determinó que las principales desventajas son la carencia de una
metodología para la transformación de especies de eucaliptos y la escasez de información a nivel
social y legislación relativa al uso de organismos genéticamente modificados.
La parte experimental de este trabajo de tesis se orientó al análisis funcional y estructural del
promotor del gen EgCBF-1 en respuesta al estrés por frío. Se aisló y secuenció el promotor EgCBF-1
y se desarrollaron construcciones para estudios de funcionalidad. Se obtuvo una secuencia de 776
pares de bases río arriba del sitio de inicio de la transcripción del gen CBF-1 de Eucalyptus globulus,
correspondiente a un segmento del promotor de dicho gen. En cuanto al análisis estructural, se
confirmó la presencia de una serie de elementos de respuesta a estrés, entre ellos, cinco sitios de unión
para el factor de transcripción EgICE-1, cuyo rol es clave en la respuesta al estrés provocado por las
bajas temperaturas. Se determinó además, que éste y otros elementos de respuesta, están también
presentes en promotores de genes ortólogos al promotor EgCBF-1.
Se utilizaron dos estrategias para evaluar la funcionalidad del promotor: ensayos de
funcionalidad mediante transformación transitoria en Nicotiana benthamiana y ensayos en plantas
trnasgénicas de Arabidopsis thaliana. En ambos casos se utilizó el gen reportero GUS bajo el control
del promotor en estudio.

Identiferoai:union.ndltd.org:UCHILE/oai:repositorio.uchile.cl:2250/102168
Date January 2009
CreatorsGuzmán Reyes, Mónica Del Carmen
ContributorsSalazar Aguirre, María Oriana, Facultad de Ciencias Físicas y Matemáticas, Departamento de Ingeniería Química y Biotecnología, Lienqueo Contreras, María Elena, Andrews Farrow, Bárbara, Stange Klein, Claudia, Krauskopf Poblete, Erwin
PublisherUniversidad de Chile
Source SetsUniversidad de Chile
LanguageSpanish
Detected LanguageSpanish
TypeTesis
RightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Chile, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/cl/

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