Fouchet är specialiserad färgningsmetod för att påvisa gallpigment i leverpreparat. Fouchet-reagens innehåller järnklorid som oxiderar gult bilirubin till grönt biliverdin i närvaro av triklorättiksyra och ger en klar grön färg på leverns gallpigment. Ökad mängd gallpigment kan ses vid sjukdom som exempelvis vid hepatocellulär cancer. Syftet med arbetet var att utifrån befintliga protokoll optimera infärgning av bindväv och gallpigment i levervävnad med hjälp av manuell histopatologisk infärgning med Fouchet. För att diagnostisera leversjukdomar där ökat gallpigment förekommer nyttjas infärgning med Fouchet vid avdelningen för Klinisk patologi i Region Kalmar län och infärgningen var i behov av optimering. Vävnad från tarm och lever användes. Metoden optimerades genom förändringar av inkubationstiden med Fouchet-reagens och van Gieson-lösning samt genom tillsats av ren pikrinsyra. Bedömningskriterierna bestod av infärgning av bindväv, muskler och gallpigment samt utvärdering av kontrast mellan bindväv, muskler och gallpigment. Bedömningen av den infärgade vävnaden gjordes av legitimerad patolog. Resultatet visade att den mest optimala färgningsmetoden var infärgning i elva minuter Fouchet följt av tre minuter ren pikrinsyra samt två minuter van Gieson. Infärgningen gav bäst bakgrundsfärg och klarast infärgning av grönt gallpigment. Slutsatsen var att den nya manuella infärgningen med Fouchet samt extra pikrinsyra utan sköljning i destillerat vatten visade ett så pass bra resultat att metoden har potential att ersätta det nuvarande infärgningssprotokollet (ursprungligt färgningsprotokoll) vid avdelningen för Klinisk patologi i Region Kalmar län. / Fouchet dye specializes in detecting bile pigments in the liver. Fouchet-reagent contains iron chloride, which oxidizes yellow bilirubin to green biliverdin in the presence of trichloroacetic acid and gives a clear green color to the liver bile pigment. Increased amounts of bile pigments can be obtained in diseases such as hepatocellular cancers. The work aimed to optimize the staining of connective tissue and bile pigments in liver tissue based on existing protocols with the help of manual histopathological staining with Fouchet. Staining with Fouchet is used at the Clinical Pathology in Kalmar to diagnose liver diseases with bile pigment. Tissue was taken from the intestine and liver. The method was optimized by changes of incubation times of tissues stained with Fouchet reagent, van Gieson solution, and the addition of pure picric acid. Assessment criteria consisted of staining of connective tissue, muscles, and bile pigments and evaluation of contrast between connective tissue, muscles, and bile pigments. The assessment of the stained tissue was made by a licensed pathologist. Optimal results were obtained with eleven minutes Fouchet followed by three minutes picric acid and two minutes van Gieson. The best-stained liver tissue was based on a consistent background color and evidence of green bile pigment staining. The conclusion was that the new manual staining with Fouchet and extra picric acid without rinsing in distilled water showed such good results that the method can potentially replace the current staining protocol at Clinical Pathology in Kalmar.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:lnu-114891 |
| Date | January 2022 |
| Creators | Larsson, Linn |
| Publisher | Linnéuniversitetet, Institutionen för kemi och biomedicin (KOB) |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | Swedish |
| Detected Language | English |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
Page generated in 0.0024 seconds