Orientador: Carla Raquel Fontana Mendonça / Coorientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Banca: Madalena Palomari Spolidorio / Banca: Juliana Cabrini Carmello / Banca: Eliane Trovatti / Banca: Cristiane Costa Quishida / Resumo: A necessidade de superar a resistência dos micro-organismos frente aos fármacos disponíveis, a fim de se chegar ao sucesso terapêutico leva a uma constante exploração de novas abordagens para este fim. Os sistemas de efluxo multidrogas tem sido um profundo obstáculo para uma terapêutica bem-sucedida utilizando-se antimicrobianos existentes hoje no mercado. A descoberta de bloqueadores desses sistemas complementa estudos envolvendo terapias nãoconvencionais, como a Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (Antimicrobial Photodynamic Therapy - aPDT). Este estudo teve como objetivo avaliar a aPDT mediada pelo azul de metileno (AM) associada com inibidores de bomba de efluxo em diferentes espécies microbianas. Para isso, foram utilizados como inibidor o verapamil, em biofilmes de Escherichia coli e Staphylococcus aureus, e verapamil e farnesol para Candida albicans. A determinação da combinação ideal de Inibidor/AM foi feita através do cruzamento de diferentes concentrações dos compostos, de tal forma que todas as combinações possíveis fossem avaliadas, nas concentrações previamente determinadas através da concentração inibitória mínima. O metabolismo celular para todas as condições experimentais foi avaliado por meio do ensaio de redução do XTT. As combinações onde foram verificadas a redução de 80% no metabolismo foram plaqueadas e a contagem de células (UFC/ml) determinada. Os resultados obtidos permitiram observar que para E. coli, foram necessárias uma dose maior de luz (44 J/cm2... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Conventional antimicrobials are mostly ineffective due to emerging antimicrobial resistance acquired by pathogenic micro-organisms. The need to overcome this resistance to reach therapeutic success has led to exploration of new approaches. Multidrug efflux systems have been a profound obstacle to achieve success in some specific cases with the available antibiotics today. The discovery of efflux pump inhibitors systems can act as an adjuvant to alternative therapies such as Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT). This study aimed to evaluate the association of aPDT mediated by methylene blue (MB), with efflux pump inhibitors in different microbial species. Verapamil was used as an inhibitor in biofilm of Escherichia coli and Staphylococcus aureus, and verapamil and farnesol were expected to block the pumps for Candida albicans. The determination of the optimal combination of Inhibitor/MB was carried out by crossing different concentrations of the compounds. Cell metabolism for all experimental conditions was assessed by XTT reduction assay. The combinations where 80% of metabolism reduction was observed, cells were plated and colony count units (cfu/ml) determined. The E. coliresults showed requirement of higher light dose (44 J/cm2 ) and a lower concentration of verapamil (215 μg/mL) to achieve reduction of 3.4 log10 (CFU/mL). Compared to S. aureus, a lower dose of light (22 J/cm2 ) was needed, and a higher concentration of verapamil (312 μg/mL), was necessary to obtain reduction of 3.65 log10 (CFU/ml). For C. albicans, verapamil presented lower reduction of biofilm viable cells compared to farnesol. Setting the same light dose (44 J/cm2 ), the combination verapamil/MB: 215/400 showed reduction of 2,82 log10 (CFU/mL) and farnesol/MB: 22/200 determined reduction of 3.82 log10 (CFU/mL). Briefly, aPDT mediated MB, associated with an efflux pump... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UNESP/oai:www.athena.biblioteca.unesp.br:UEP01-000877926 |
| Date | January 2016 |
| Creators | Coletti, Tatiana Maria Starck Fogaça de Aguiar. |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Ciências Farmacêuticas. |
| Publisher | Araraquara, |
| Source Sets | Universidade Estadual Paulista |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | text |
| Format | 95 f. : |
| Relation | Sistema requerido: Adobe Acrobat Reader |
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