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Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Os tripanossomatídeos são organismos caracterizados pelo controle póstranscricional da expressão gênica, principalmente em nível de tradução. Na tradução em eucariotos, tem grande destaque o complexo eIF4F, sendo um de seus principais componentes o fator de iniciação da tradução eIF4E. Já foram descritos em tripanossomatídeos seis homólogos para o eIF4E, nomeados EIF4E1 a 6. Em
um estudo com Leishmania amazonensis, focado no EIF4E3, percebeu-se que seu
perfil de expressão se alterava rapidamente numa curva de crescimento, com este apresentando ao menos duas bandas. As mudanças observadas sugeriam
modificações pós-traducionais do tipo fosforilação, algo posteriormente confirmado. Analisando-se a sequência do EIF4E3 de Leishmania, foi possível identificar a presença de possíveis sítios de fosforilação e de ligação a parceiros funcionais como homólogos do eIF4G, outro componente do complexo eIF4F, e da proteína de
ligação á cauda poli-A (PABP). No presente estudo foi analisado o perfil de
expressão e a capacidade de ligação a parceiros funcionais do EIF4E3 de
Leishmania superexpresso em células transfectadas e no qual foram introduzidas
mutações em motivos específicos. Os resultados mostraram um perfil de expressão de ao menos três bandas para o EIF4E3 de L. amazonensis e duas para L. infantum, com o sítio S75, presente apenas na primeira, sendo o responsável por esta
diferença. Em ensaios de imunoprecipitação, foi identificado um motivo que, quando mutado, aboliu a ligação do EIF4E3 com a PABP3, sugerindo este como o sítio de
interação entre os fatores. Com a análise do efeito de mutações no EIF4E3 de L.
amazonensis, foi percebido que ao se mutar três motivos implicados na à PABP e o
possível sítio de ligação ao EIF4G, sua fosforilação diminuiu drasticamente,
sugerindo a necessidade destas interações para que a fosforilação ocorra. Estes
resultados indicam um complexo mecanismo de modificações pós-traducionais
responsáveis pela regulação do EIF4E3 e contribuem a para a caracterização da
sua função em Leishmania
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/14341 |
| Date | January 2015 |
| Creators | Moraes, Rômulo Murilo do Nascimento |
| Contributors | Reis, Christian Robson de Souza, Melo Neto, Osvaldo Pompílio de, Silva Filha, Maria Helena Neves Lobo, Melo, Tatiany Patrícia Romão Pompílio de, Melo Neto, Osvaldo Pompílio de |
| Publisher | Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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